The National Library of Medicine har længe leveret programmer og tjenester til professionelle medicinske forskere og sundhedsplejersker, herunder MEDLINE og de forskellige tjenester, der giver adgang til det, såsom PubMed og Entrez. I 1990’erne brugte flere medlemmer af den brede offentlighed disse tjenester, efterhånden som internetadgang blev udbredt. Men ikke-professionelle brugere kunne have gavn af pålidelige sundhedsoplysninger i et format, der er tilgængeligt for lægfolk. National Library of Medicine introducerede MedlinePlus i oktober 1998 for at tilbyde en ikke-kommerciel onlinetjeneste i lighed med f.eks. den kommercielle WebMD. I 2010 supplerede en anden NCBI-tjeneste, PubMed Health, MedlinePlus med kuraterede sundhedsoplysninger til forbrugerne; PubMed Health fokuserer især på at finde oplysninger om behandlingers kliniske effektivitet.
MedlinePlus indeholdt oprindeligt 22 sundhedsemner på engelsk, som blev udvidet til næsten 1000 sundhedsemner på engelsk og spansk samt links til sundhedsoplysninger på over 40 sprog. MedlinePlus blev anerkendt af den medicinske biblioteksforening for sin rolle i forbindelse med formidling af sundhedsoplysninger. Webstedet scorede 84 i det amerikanske Customer Satisfaction Index for 2010.
I 2000’erne blev A.D.A.M.’s medicinske encyklopædi indarbejdet i MedlinePlus. “Animated Dissection of Anatomy for Medicine, Inc.” er et NASDAQ-noteret børsnoteret selskab med hovedsæde i Atlanta, Georgia, der leverer sundhedsinformation til forbrugere og teknologiske produkter til fordel for sundhedsorganisationer, arbejdsgivere, forbrugere og uddannelsesinstitutioner.