Die National Library of Medicine bietet seit langem Programme und Dienste für professionelle medizinische Wissenschaftler und Gesundheitsdienstleister an, darunter MEDLINE und die verschiedenen Dienste, die darauf zugreifen, wie PubMed und Entrez. In den 1990er Jahren nutzten immer mehr Bürger diese Dienste, da der Internetzugang weit verbreitet war. Aber auch nicht-professionelle Nutzer könnten von zuverlässigen Gesundheitsinformationen in einem für Laien zugänglichen Format profitieren. Die National Library of Medicine führte im Oktober 1998 MedlinePlus ein, um einen nicht-kommerziellen Online-Dienst anzubieten, der beispielsweise dem kommerziellen WebMD ähnelt. Im Jahr 2010 wurde MedlinePlus durch einen weiteren NCBI-Dienst, PubMed Health, ergänzt, der kuratierte Gesundheitsinformationen für Verbraucher anbietet; PubMed Health konzentriert sich insbesondere auf die Suche nach Informationen über die klinische Wirksamkeit von Behandlungen.
MedlinePlus bot zunächst 22 Gesundheitsthemen in englischer Sprache an, die auf fast 1000 Gesundheitsthemen in englischer und spanischer Sprache erweitert wurden, sowie Links zu Gesundheitsinformationen in über 40 Sprachen. MedlinePlus wurde von der Medical Library Association für seine Rolle bei der Bereitstellung von Gesundheitsinformationen ausgezeichnet. Im American Customer Satisfaction Index für 2010 erhielt die Website 84 Punkte.
In den 2000er Jahren wurde die medizinische Enzyklopädie der A.D.A.M. in MedlinePlus integriert. Die „Animated Dissection of Anatomy for Medicine, Inc.“ ist eine an der NASDAQ gehandelte Aktiengesellschaft mit Sitz in Atlanta, Georgia, die Gesundheitsinformationen für Verbraucher und Technologieprodukte für Gesundheitsorganisationen, Arbeitgeber, Verbraucher und Bildungseinrichtungen anbietet.