Abstract
In dieser Studie sollten Referenzbereiche für Serumharnsäure bei der gesunden erwachsenen Bevölkerung Assams festgelegt werden. Anhand von Proben von 1470 Personen im Alter von 35 bis 86 Jahren wurden alters- und geschlechtsspezifische Referenzbereiche für den Serumharnsäurespiegel nach der Zentilmethode (zentrales 95-Perzentil) ermittelt. Es handelte sich um 51 % () Männer und 49 % () Frauen; 75,9 % () von ihnen stammten aus städtischen Gebieten und die restlichen 24,1 % () aus ländlichen Gebieten. Die Mehrheit der Bevölkerung war Nicht-Vegetarier (98,6%, ) und nur 1,4% () waren Vegetarier. Das Durchschnittsalter, das Gewicht, die Größe und die Harnsäure der untersuchten Gruppe waren Jahre, kg, cm bzw. mg/dL. Es besteht ein statistisch signifikanter Unterschied in den Mittelwerten der oben genannten Parameter zwischen Männern und Frauen. Der beobachtete Referenzbereich der Harnsäure in der Bevölkerung liegt bei 2,6-8,2 mg/dL und damit über dem derzeit im Labor verwendeten Referenzbereich. Mit Ausnahme des Geschlechts () wurde kein signifikanter Zusammenhang zwischen der Harnsäure und anderen ausgewählten Faktoren festgestellt.
1. Einleitung
Serumharnsäure (SUA) ist das wichtigste Endprodukt des Purinstoffwechsels beim Menschen; und der SUA-Spiegel wird streng durch das Gleichgewicht zwischen Harnsäureproduktion und -ausscheidung kontrolliert. In einer Reihe früherer Studien wurde über den Zusammenhang zwischen Hyperurikämie und verschiedenen kardiovaskulären Erkrankungen und deren Risikofaktoren, einschließlich des metabolischen Syndroms (MS), berichtet. Den früheren Studien zufolge besteht nicht nur bei offener Hyperurikämie, sondern auch bei SUA-Werten, die fast im Normbereich liegen, eine positive Korrelation mit dem MS . Neuere Studien haben gezeigt, dass der SUA-Spiegel signifikant mit der nichtalkoholischen Fettlebererkrankung assoziiert ist.
Der derzeitige „Referenzwert“ oder „Normalbereich“ für Hyperurikämie lässt Patienten mit potenziellen Stoffwechselstörungen oft nicht erkennen. Die empfohlenen Kriterien für die Auswahl von Probanden als Quelle für Referenzwerte, die Beschreibung der Bedingungen für die Probenentnahme und die statistische Terminologie für die Beschreibung dieser Werte wurden kürzlich in der Humanmedizin umrissen. Der Ansatz zur Entwicklung von Referenzwerten wurde als wichtiger Schritt zur klinischen Interpretation von Labordaten angesehen. Der Kliniker muss natürlich die Anamnese, die klinischen Anzeichen, das Auftreten von Krankheiten usw. mit den Labordaten abwägen. Die meisten der medizinischen Laboratorien verwendet werden, um „normale Bereiche“ nicht so bezogen, aber im Idealfall Testergebnisse der biochemischen Parameter sollte als eine Bevölkerung, deren Status definiert ist bezogen werden.
Der Referenzbereich eines bestimmten Parameters ist definiert als die Konzentration dieses Parameters in einer Gruppe von klinisch gesunden Personen . Unter normalen physiologischen Bedingungen werden diese Parameter durch hämostatische Mechanismen innerhalb eines bestimmten Bereichs gehalten. Bei gesunden Personen variieren sie in verschiedenen Populationen erheblich. In Körperflüssigkeiten und bei Abwesenheit von Krankheiten werden sie durch verschiedene Faktoren wie Alter, Geschlecht, Ernährungsgewohnheiten der Menschen, geografische Lage und Klima beeinflusst. Darüber hinaus weisen mehrere dieser Parameter tages- und jahreszeitliche Schwankungen auf; die Verabreichung von Medikamenten oder Impfstoffen zu therapeutischen Zwecken oder für klinische Studien kann ebenfalls erhebliche Schwankungen verursachen. Sie können sich auch aufgrund unterschiedlicher Techniken, die von verschiedenen Labors verwendet werden, ändern. Die Parameter können auch infolge pathologischer Zustände variieren, die sich auf wichtige Körperorgane und -systeme auswirken, die diese Stoffe produzieren, absondern oder speichern, wie z. B. die Leber, die Bauchspeicheldrüse, die Nieren, das Knochenmark und das Immunsystem. In der klinischen Chemie basieren die Referenzwerte in der Regel auf den Werten der westlichen Bevölkerung; diese stimmen in der Regel nicht mit der indischen Bevölkerung überein. Da Referenzwerte von Klinikern zur Interpretation von Messergebnissen herangezogen werden, sollten sie eine definierte Bevölkerungsgruppe korrekt repräsentieren, die eine große Ähnlichkeit mit den zu untersuchenden Patienten haben sollte. Da bis heute keine gut dokumentierten Referenzwerte für Harnsäure in der assamesischen Bevölkerung ermittelt wurden, planten wir diese Studie, um die Referenzwerte für Harnsäure in der indischen assamesischen Bevölkerung zu ermitteln, wobei wir uns vor Augen hielten, dass für die Überwachung physiologischer oder pathologischer Veränderungen Referenzlaborbereiche erforderlich sind.
2. Materialien und Methoden
2.1. Studienpopulation
Gesamt 2000 Probanden beider Geschlechter mit unterschiedlichem sozioökonomischem Status wurden für die Studie ausgewählt. Anhand eines Standardfragebogens wurden Basisinformationen über die Ernährung (pflanzlich/nicht pflanzlich), die medizinische und familiäre Vorgeschichte sowie Informationen über den Lebenszeitkonsum von Tabak (ja/nein), alkoholischen Getränken (ja/nein) und die aktuelle körperliche Aktivität erhoben. Größe und Gewicht wurden ebenfalls gemessen, wobei die Probanden einen leichten Kittel trugen und barfuß standen. Die Probanden kamen für die Teilnahme an dieser Studie in Frage, wenn sie nach dem erforderlichen Screening alle Kriterien gemäß den in Tabelle 1 aufgeführten Ausschlusskriterien erfüllten.
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2.2. Probenahme
12 Stunden über Nacht nüchtern EDTA-, Fluorid- und geronnene venöse Blutproben wurden unabhängig von den jahreszeitlichen Schwankungen das ganze Jahr über entnommen. Serum und Plasma wurden durch Zentrifugation bei 3000 U/min für 15 Minuten aufbereitet und innerhalb von 4 Stunden nach der Entnahme analysiert. Von den 2000 analysierten Proben wurden 1470 in die Studie aufgenommen, nachdem die Ergebnisse, wie in Tabelle 2 aufgeführt, eliminiert worden waren.
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2.3. Schätzmethode
Die Schätzung der Serumharnsäure erfolgte mittels vollautomatischer indirekter Uricase-UV-Methode. Diese Methode ist eine Abwandlung der Uricase-Methode, die zuerst von Bulgar und Johns beschrieben und später von Kalchan modifiziert wurde. Die Harnsäure, die bei 293 nm Licht absorbiert, wird von der Uricase in Allantoin umgewandelt, das bei 293 nm nicht absorbiert. Die Änderung der Absorption bei 293 nm aufgrund des Verschwindens der Harnsäure ist direkt proportional zur Konzentration der Harnsäure in der Probe und wird mit einer bichromatischen (293, 700 nm) Endpunkttechnik gemessen. Bei dieser Methode zur Bestimmung von Serumharnsäure werden die anfängliche UV-Extinktion der Reaktionslösung vor der Uricaseeinwirkung und die Hintergrund-Extinktion nach Abschluss der Uricase-Reaktion separat bestimmt, um die Netto-Extinktion der Harnsäure zu ermitteln. Die UV-Uricase-Methode ist resistent gegen häufige endogene Störungen, wie Ascorbat und Glutathion, und lässt sich leicht in einem Autoanalysator kalibrieren. Aufgrund dieser Vorteile wurde sie einst von der International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (IFCC) als Referenzmethode empfohlen.
2.4. Validierung der Methode
Die interne Validierung der Methode erfolgt gemäß den CLSI-Richtlinien und umfasst die Berechnung der Präzision, des Bias, die Überprüfung der Linearität, der Empfindlichkeit und der Assay-Interferenz. Die Präzision und Verzerrung werden anhand von 20 Wiederholungen über einen Zeitraum von 20 Tagen mit QC-Materialien berechnet (Tabelle 3). Die Linearität wurde überprüft und die Methode ist bis zu 20 mg/dL linear.
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Die Harnsäuremethode wurde gemäß CLSI/NCCLS EP7-P auf Interferenzen durch Hämolyse, Ikterus und Lipämie untersucht. Die Abweichung, definiert als die Differenz zwischen der Kontrollprobe (ohne Störsubstanz) und der Testprobe (mit Störsubstanz), ist in Tabelle 4 dargestellt. Eine Verzerrung von mehr als 10 % wird als „Interferenz“ betrachtet.“
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Die analytische Empfindlichkeit beträgt 0,01 mg/dL. Sie stellt die niedrigste Konzentration von Harnsäure dar, die von Null unterschieden werden kann.
2.5. Qualitätssicherung/Qualitätskontrolle
Um die Richtigkeit und Präzision der Testergebnisse zu gewährleisten, wurden alle präanalytischen, analytischen und postanalytischen Vorsichtsmaßnahmen berücksichtigt. Instrumente, Personal und Verfahrensvalidierung wurden durch ein internes Qualitätskontrollprogramm (QC) mit der Berechnung von Standardabweichungen (SD) und Variationskoeffizienten (CV) durchgeführt. Sie gibt einen Überblick über das für die Auswertung des Assays verwendete Qualitätskontrollmaterial und den täglichen Variationskoeffizienten. Das Labor hat auch an einem externen Qualitätssicherungsprogramm (EQAS) mit zufriedenstellenden Ergebnissen teilgenommen. Als Qualitätssicherungsmaßnahme wurden alle notwendigen präanalytischen, analytischen und postanalytischen Vorkehrungen getroffen, um sicherzustellen, dass diese Daten nicht verfälscht wurden.
2.6. Statistische Analyse
Alle statistischen Berechnungen wurden mit der Software Statistical Package for Social Sciences (SPSS) Version 7.5 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) durchgeführt. Mittelwert, Median und Standardabweichung wurden für normalverteilte kontinuierliche Daten berechnet. Um die Streuung der Daten weiter zu quantifizieren, wurden das 2,5. und das 97,5. Perzentil angegeben.
Für die demografischen und biochemischen Merkmale wurden die kontinuierlichen Variablen als Mittelwert und Standardabweichung (SD) ausgedrückt, während die kategorischen Variablen in Häufigkeit und Prozentsatz zusammengefasst wurden. Alle statistischen Tests waren zweiseitig, und a wurde als statistisch signifikantes Niveau anerkannt.
3. Ergebnisse
In der vorliegenden Studie wurde ein Querschnitt der Gemeinde ausgewählt, und nach einem sorgfältigen Screening wurden von 2000 ausgewählten Personen 630 wegen verschiedener abnormaler biochemischer Parameter ausgeschlossen, und insgesamt 1470 Personen wurden schließlich für die Aufnahme in diese Studie ausgewählt.
Die Stichprobe der Studie ist zu 51% () männlich und zu 49% () weiblich mit einem Verhältnis von 1,05 : 1. Die Geschlechterverteilung der Bevölkerung ist in Abbildung 1 dargestellt.
Verteilung der Geschlechter.
Die Ergebnisse der ausgewählten Merkmale der Zielpopulation zusammen mit dem mittleren 95-Perzentil (Mittelwert ± 2 SD) sind in Tabelle 5 dargestellt, und die Verteilungen der Serumharnsäurekonzentrationen sind in Abbildung 2 gezeigt.
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Verteilung der Harnsäure.
Das Durchschnittsalter, das Gewicht, die Größe und der Serumharnsäurespiegel der Gesamtbevölkerung sind Jahre, kg, cm bzw. mg/dL. Die Altersgruppe der Zielbevölkerung reicht von 35 bis 86 Jahren. Es ist zu beobachten, dass alle analysierten Parameter bei Männern einen deutlich höheren Mittelwert aufweisen als bei Frauen. So liegt beispielsweise der Mittelwert für das Alter bei Männern bei 55,3 Jahren im Vergleich zu 51,7 Jahren bei Frauen. Auch die Mittelwerte für Gewicht, Größe und Harnsäure sind bei den Männern (64,3 kg, 164,4 cm bzw. 6,1 mg/dL) signifikant höher als bei den Frauen (60,7 kg, 155,4 cm bzw. 4,7 mg/dL). 98,6% () der Bevölkerung sind Nicht-Vegetarier im Vergleich zu nur 1,4% () Vegetariern. Was die Verteilung der Wohnorte betrifft, so stammen 75,9 % () der Studienbevölkerung aus städtischen Gebieten und 24,1 % () aus ländlichen Gebieten.
Der Mittelwert, Median, SD und die 2,5 und 97,5 Perzentile der Harnsäure (d.h., untere und obere Grenze des zentralen 95-Perzentils) der Bevölkerungsproben, je nach Alter und Geschlecht, sind in Abbildung 3 und Tabelle 6 zusammengefasst.
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| Ref. Bereich der Harnsäure, der derzeit im Labor verwendet wird – Männer: 3,5-7,7 mg/dL und Frauen: 2,6-6,0 mg/dL. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Vergleich der Ergebnisse der Harnsäure zwischen Männern und Frauen.
Es ist zu beobachten, dass mit zunehmendem Alter auch der mittlere und der mediane Harnsäurespiegel allmählich ansteigen, außer in der Altersgruppe von 81-90 Jahren, wo die Zahl der Probanden im Vergleich zu den anderen klassifizierten Altersgruppen sehr gering ist. Das zentrale 95-Perzentil des Serumharnsäurespiegels unterscheidet sich ebenfalls in den verschiedenen Altersgruppen, und es zeigt sich, dass er in der Altersgruppe der 61-70-Jährigen viel breiter ist und zwischen 2,4 mg/dL und 8,8 mg/dL liegt. In allen Altersgruppen haben die Männer höhere Mittel- und Medianwerte als die Frauen. In der jüngeren Altersgruppe (31-40 Jahre) übersteigen die Werte der Männer die der Frauen um etwa 2,2 mg/dL. Mit zunehmendem Alter nimmt dieser Unterschied jedoch ab. In der Altersgruppe von 41-50 Jahren beträgt der Unterschied beispielsweise 1,7 mg/dL, und danach ist er auf fast 1 mg/dL gesunken. Die Ergebnisse der weiblichen Probanden sind im Alter von 31-50 Jahren normal verteilt, weisen aber mit zunehmendem Alter eine positive Schiefe auf. Der Mittelwert zeigt eine steigende Tendenz mit einem Maximum im Alter von 51-60 Jahren und danach einen allmählichen Rückgang. Bei Männern ist der Trend umgekehrt. Der Mittelwert ist in der jüngeren Altersgruppe, d. h. im Alter zwischen 31 und 50 Jahren, höher. Die Durchführung von Chi-Quadrat-Tests (Tabelle 7) zeigt, dass die Harnsäure einen hochsignifikanten Zusammenhang mit dem Geschlecht () hat, aber keinen statistisch signifikanten Zusammenhang mit dem Alter (), der Größe (), dem Gewicht (), der Ernährung () und dem Wohnort () aufweist.
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4. Diskussion
Das von der IFCC empfohlene Verfahren, genügend Proben aus einer ausreichend großen Referenzpopulation zu ermitteln, zu sammeln und zu messen, ist für die meisten Labors nicht durchführbar, so dass sie sich auf Referenzbereiche stützen müssen, die auf Werten beruhen, die mit verschiedenen, an einer ausländischen Bevölkerung standardisierten Kits ermittelt wurden, und nicht auf Studien, die an einer gut charakterisierten Bevölkerungsstichprobe durchgeführt wurden. Unter Berücksichtigung all dieser Tatsachen wurde für die vorliegende Studie eine große, repräsentative assamesische Bevölkerung sowohl aus den städtischen als auch aus den ländlichen Gebieten verwendet, die fast alle Stämme und ethnischen Gruppen umfasst, die in Assam gelebt haben und alle notwendigen Kriterien erfüllen.
In der vorliegenden Studie haben wir einen sehr breiten Referenzbereich für Harnsäure gefunden, der von 2,6 mg/dL bis 8,2 mg/dL reicht. Bei Männern liegt er bei 3,5-8,7 mg/dL und bei Frauen bei 2,5-6,9 mg/dL. Die oberen Grenzwerte (d. h. 97,5 Perzentile) liegen bei beiden um fast 1 mg/dL über den in unserem Labor verwendeten Referenzbereichen (Männer: 3,5-7,7 mg/dL und Frauen: 2,6-6,0 mg/dL). Dies könnte durch die nicht standardisierte Auswahl der Probanden verursacht worden sein. Auch der berechnete Referenzbereich für Männer in unserer Studie ist breiter als der Referenzbereich, der in einer Studie von Cook et al. aus dem Jahr 1970 ermittelt wurde. Es ist auch zu beobachten, dass Männer einen signifikant höheren Mittelwert haben als Frauen (), und das ist in allen klassifizierten Altersgruppen auffällig. Bei Männern ändert sich der Mittelwert mit dem Alter nur geringfügig, aber mit zunehmendem Alter besteht eine Tendenz zu einer negativen Schieflage. Bei den Frauen ist das Gegenteil der Fall, d. h. die Ergebnisse der Frauen weisen mit zunehmendem Alter eine Tendenz zu einer positiven Schiefe auf. Ähnliche Ergebnisse werden auch in einer Studie von Gardner und Scott aus dem Jahr 1980 beobachtet. Es wird auch festgestellt, dass der mittlere Harnsäurewert in der Gruppe der prämenopausalen Frauen niedriger ist als in der Gruppe der postmenopausalen Frauen. Dieser Anstieg wurde auch in einigen früheren Studien festgestellt, und es wird angenommen, dass er auf den Östrogenverlust in der Postmenopause zurückzuführen ist. Bengtsson und Tibblin (1974) und McPherson et al. (1978) verglichen den Serumharnsäurespiegel zwischen altersgleichen prä- und postmenopausalen Frauen und fanden keinen signifikanten Unterschied zwischen ihren Harnsäurespiegeln. Ohne Berücksichtigung des Geschlechts wurde in unserer Studie kein signifikanter Zusammenhang zwischen der Harnsäure und anderen ausgewählten Faktoren festgestellt.
5. Schlussfolgerung
Unsere Studie hat mehrere Einschränkungen, wie z. B. die fehlende Nachbeobachtung der Probanden und die Stichprobengröße. Wir haben die Auswirkungen der Rasse und des sozioökonomischen Status nicht untersucht, da unser Ziel darin bestand, den Zustand der Gesamtbevölkerung widerzuspiegeln. Ein weiterer Mangel der Studie ist die Nichtberücksichtigung von Altersgruppen unter 30 Jahren. Bei den Teilnehmern dieser Studie handelte es sich um eine Gruppe relativ älterer Personen, von denen ein Teil zu einer Vorsorgeuntersuchung kam und ein anderer Teil aus einer Kontrollgruppe einer Studie über Schlaganfälle stammte. Eine große prospektive Studie, die alle Altersgruppen verschiedener ethnischer Gruppen der nordöstlichen Region einschließt, wäre sehr viel hilfreicher, wenn man bedenkt, dass unser Krankenhaus (GNRC Hospitals, Dispur) die Überweisungsstelle des gesamten Nordostens ist.
Interessenkonflikt
Die Autoren erklären, dass es keinen Interessenkonflikt bezüglich der Veröffentlichung dieser Arbeit gibt.