Questo capitolo descrive l’utilità della proteina fluorescente verde (GFP) come gene reporter nello studio dell’espressione genica. GFP emette luce fluorescente su eccitazione, senza l’aggiunta di substrato o cofattore, sia in vivo che in vitro. L’attività di fluorescenza della GFP può essere rilevata utilizzando un microscopio a fluorescenza, un fluorimetro, una macchina per la selezione delle cellule attivata dalla fluorescenza (FACS) o un lettore di micropiastre per immagini. Enhanced GFP (EGFP) è un mutante GFP con una fluorescenza più brillante che rende il rilevamento molto più sensibile. L’uso di GFP come gene reporter offre una serie di vantaggi. Questi includono l’analisi in tempo reale, la manipolazione minima del campione, la possibilità di analisi di grandi quantità e l’alta sensibilità. Tuttavia, GFP è una proteina stabile, per cui si accumula facilmente quando viene espressa nelle cellule. L’accumulo rende l’espressione inducibile del reporter insensibile a qualsiasi cambiamento di induzione e quindi sarebbe difficile da usare in studi di cinetica. Questo capitolo discute l’utilità di EGFP e EGFP destabilizzato (dEGFP) come reporter di trascrizione fondendoli con la sequenza di legame NF-KB e il promotore della timicline chinasi (TK), e confrontando la differenza di espressione tra EGFP e dEGFP. Si discute che sia EGFP che dEGFP possono essere usati come reporter negli studi sulla trascrizione. Inoltre, dEGFP è più sensibile in risposta ai cambiamenti nel trattamento del fattore di necrosi tumorale (TNF) a causa del suo tasso di turnover più veloce.