L’intervallo di riferimento per il tempo di protrombina dipende dal metodo analitico usato, ma di solito è intorno ai 12-13 secondi (i risultati devono sempre essere interpretati usando l’intervallo di riferimento del laboratorio che ha eseguito il test), e l’INR in assenza di terapia anticoagulante è 0,8-1,2. L’intervallo target per l’INR nell’uso di anticoagulanti (es. warfarin) è da 2 a 3. In alcuni casi, se si pensa che sia necessaria un’anticoagulazione più intensa, l’intervallo target può arrivare a 2,5-3,5 a seconda dell’indicazione all’anticoagulazione.
MetodologiaModifica
Il tempo di protrombina è tipicamente analizzato da un tecnico di laboratorio su uno strumento automatizzato a 37 °C (come approssimazione nominale della normale temperatura del corpo umano).
- Il sangue viene prelevato in una provetta contenente citrato di sodio liquido, che agisce come anticoagulante legando il calcio in un campione. Il sangue viene mescolato, poi centrifugato per separare le cellule del sangue dal plasma (dato che il tempo di protrombina è più comunemente misurato usando il plasma del sangue). Nei neonati, viene utilizzato un campione di sangue intero capillare.
- Un campione di plasma viene estratto dalla provetta e messo in una provetta di misurazione (Nota: per una misurazione accurata, il rapporto tra sangue e citrato deve essere fissato e deve essere etichettato sul lato della provetta di misurazione dalla società produttrice; molti laboratori non eseguiranno il test se la provetta è sotto riempita e contiene una concentrazione relativamente alta di citrato – la diluizione standardizzata di 1 parte di anticoagulante per 9 parti di sangue intero non è più valida).
- Poi si aggiunge alla provetta un eccesso di calcio (in una sospensione di fosfolipidi), invertendo così gli effetti del citrato e permettendo al sangue di coagulare di nuovo.
- Infine, per attivare la via della cascata della coagulazione estrinseca / fattore tissutale, si aggiunge il fattore tissutale (noto anche come fattore III) e si misura otticamente il tempo che il campione impiega per coagulare. Alcuni laboratori utilizzano una misurazione meccanica, che elimina le interferenze dei campioni lipemici e itterici.
Rapporto del tempo di protrombinaModifica
Il rapporto del tempo di protrombina è il rapporto del tempo di protrombina misurato di un soggetto (in secondi) con il PT normale di riferimento del laboratorio. Il rapporto PT varia a seconda dei reagenti specifici utilizzati ed è stato sostituito dall’INR. INR elevato può essere utile come un rapido e poco costoso diagnostico di infezione in persone con COVID-19.
International normalized ratioEdit
Il risultato (in secondi) per un tempo di protrombina eseguito su un individuo normale varia a seconda del tipo di sistema analitico impiegato. Ciò è dovuto alle variazioni tra i diversi tipi e lotti del fattore di tessuto del produttore utilizzato nel reagente per eseguire il test. L’INR è stato ideato per standardizzare i risultati. Ogni produttore assegna un valore ISI (International Sensitivity Index) per ogni fattore tissutale che produce. Il valore ISI indica come un particolare lotto di fattore tissutale si confronta con un fattore tissutale di riferimento internazionale. L’ISI è solitamente compreso tra 0,94 e 1,4 per le tromboplastine più sensibili e 2,0-3,0 per quelle meno sensibili.
L’INR è il rapporto tra il tempo di protrombina di un paziente e un campione normale (controllo), elevato alla potenza del valore ISI per il sistema analitico utilizzato.
INR = ( PT test PT normale ) ISI {displaystyle {\testo{INR}}===left({frac {{{testo{PT}}_{testo{test}}}_{testo{normale}}}}\right)^{{testo{ISI}}}
InterpretationEdit
Il tempo di protrombina è il tempo necessario al plasma per coagulare dopo l’aggiunta di fattore tissutale (ottenuto da animali come i conigli, o fattore tissutale ricombinante, o dal cervello di pazienti sottoposti ad autopsia). Questo misura la qualità della via estrinseca (così come la via comune) della coagulazione. La velocità della via estrinseca è fortemente influenzata dai livelli di fattore VII funzionale nel corpo. Il fattore VII ha un’emivita breve e la carbossilazione dei suoi residui di glutammato richiede la vitamina K. Il tempo di protrombina può essere prolungato in seguito a carenze di vitamina K, terapia con warfarin, malassorbimento o mancanza di colonizzazione intestinale da parte di batteri (come nei neonati). Inoltre, la scarsa sintesi del fattore VII (a causa di malattie epatiche) o l’aumento del consumo (nella coagulazione intravascolare disseminata) possono prolungare il PT.
L’INR è tipicamente usato per monitorare i pazienti in terapia con warfarin o con anticoagulanti orali correlati. Il range normale per una persona sana che non usa warfarin è 0,8-1,2, e per le persone in terapia con warfarin un INR di 2,0-3,0 è di solito l’obiettivo, anche se l’INR obiettivo può essere più alto in situazioni particolari, come per quelli con una valvola cardiaca meccanica. Se l’INR è al di fuori dell’intervallo target, un INR alto indica un rischio maggiore di sanguinamento, mentre un INR basso suggerisce un rischio maggiore di sviluppare un coagulo.
Fattori che determinano l’accuratezzaModifica
L’anticoagulante del Lupus, un inibitore circolante che predispone alla trombosi, può alterare i risultati del PT, a seconda del test utilizzato. Le variazioni tra le varie preparazioni di tromboplastina hanno portato in passato a una minore accuratezza delle letture dell’INR, e uno studio del 2005 ha suggerito che nonostante gli sforzi di calibrazione internazionale (per INR) c’erano ancora differenze statisticamente significative tra i vari kit, mettendo in dubbio la tenuta a lungo termine del PT/INR come misura per la terapia anticoagulante. Infatti, una nuova variante del tempo di protrombina, il tempo di protrombina Fiix, destinato esclusivamente al monitoraggio del warfarin e di altri antagonisti della vitamina K, è stato inventato e recentemente è diventato disponibile come test fabbricato. Il tempo di protrombina Fiix è influenzato solo da riduzioni del fattore II e/o del fattore X e questo stabilizza l’effetto anticoagulante e sembra migliorare l’esito clinico secondo uno studio clinico randomizzato in cieco avviato dallo sperimentatore, The Fiix-trial. In questo studio il tromboembolismo è stato ridotto del 50% durante il trattamento a lungo termine e nonostante ciò il sanguinamento non è aumentato.