então vamos falar sobre a ligação cooperativa que é um tópico muito interessante quando se discute a cinética enzimática mas primeiro vamos rever a ideia de que podemos dividir a catálise enzimática em dois passos primeiro A ligação da enzima de substrato e segundo a formação do produto e usando esta ideia podemos derivar o michaelis-A equação de E Plus, que é muito útil para analisar quantitativamente a cinética enzimática, também se lembra que à medida que você aumenta a concentração do substrato, a velocidade de formação do produto se estabilizará em seu valor máximo como mostrado neste gráfico agora a primeira coisa que eu quero falar é que algumas proteínas podem ligar mais de um substrato e nem todas as enzimas têm apenas um local ativo para que E Plus s possam formar es através do que é chamado reação 1, mas algumas enzimas podem reagir com outra molécula de substrato para formar es 2 através do que eu chamei reação 2 e novamente para formar o es 3 através da reação 3 e assim por diante agora estas enzimas podem formar produto em qualquer fase do seu processo não importa quantas moléculas tenham substrato agora você esperaria que a taxa de reação 1 fosse mais rápida do que a taxa de reação 2 se estivermos olhando para o exemplo de uma enzima com 3 locais de ligação do substrato há 3 locais vazios disponíveis para o substrato divino através da reação 1 e apenas dois disponíveis para a reação 2 então você esperaria que a taxa 1 fosse mais rápida da mesma forma a taxa 2 seria mais rápida do que a taxa 3 pela mesma razão e a idéia é que a saturação do local ativo não aumenta linearmente com a concentração do substrato agora eu percebo que pode ser uma boca cheia, então vamos olhar para ela graficamente, mas também vamos mostrar uma exceção a esta regra, então neste primeiro gráfico eu tracei a concentração do substrato contra a saturação percentual da enzima e como você pode ver os níveis da curva fora como os locais de ligação do substrato se tornam ocupados, torna-se difícil encontrar mais moléculas de substrato como você tem mais moléculas de substrato ligado em seguida eu vou desenhar um que você também pode ver em algumas enzimas e é aí que a ligação do substrato acontece mais rapidamente à medida que os locais de ligação se tornam locais ocupados de ligação do substrato muda a afinidade do substrato e nós chamamos a isso de cooperatividade agora em relação à cooperatividade podemos definir 3 novas idéias positivamente cooperativa ligação ocorre quando a ligação do substrato aumenta a afinidade das enzimas para um substrato subsequente ligação cooperativa negativa ocorre quando a ligação do substrato diminui a afinidade das enzimas para o substrato subsequente mais do que você normalmente esperaria e nãoligação cooperativa é o mesmo que o primeiro exemplo em que a ligação do substrato não afecta a afinidade das enzimas para as moléculas do substrato, por isso vamos ver isto graficamente se tivermos uma proteína com, digamos, cinco locais de ligação e traçarmos a fracção ocupada em relação à concentração do substrato, chegaríamos a três curvas possíveis a curva verde que assume uma forma sigmoidal representaria uma enzima com cooperatividade positiva a curva azul para a forma hiperbólica representaria uma enzima com forma nãoligação cooperativa e a curva vermelha preferiria uma enzima com ligação negativamente cooperativa agora lembre-se que os efeitos da cooperatividade só são vistos depois de algum substrato já ter sido ligado, razão pela qual a diferença na fração ocupada entre as três curvas é muito menor, são valores menores como o 1/5 que mostrei aqui do que está nos valores mais altos, então vamos olhar para um exemplo específico de um par de proteínas, então a hemoglobina ou HB é a molécula portadora de oxigênio que você encontra no sangue humano e pode se ligar até um total de quatro moléculas de oxigênio e apresenta uma mioglobina de ligação positiva cooperativa, por outro lado que é a molécula transportadora de oxigênio que você encontra no tecido muscular só pode ligar uma molécula de oxigênio no total e, como só pode ligar uma molécula, deve exibir uma ligação não cooperativa, uma vez que não há substrato subsequente para falar agora se fizermos um gráfico onde plotamos a fração de locais ativos ligados em cada um destes e como se trata de um gás, vamos usar pressão em vez de concentração, pode-se ver que a curva sigmóide vermelha associada à ligação cooperativa positiva das hemoglobinas parece diferente da curva hiperbólica azul associada à nãoligação cooperativa, então o que aprendemos bem primeiro aprendemos que algumas proteínas podem ligar mais de um equivalente de substrato e depois aprendemos que existem três tipos diferentes de ligação cooperativa positiva negativa e não cooperativa finalmente aprendemos sobre proteínas que exibem dois tipos diferentes de ligação cooperativa que foram as moléculas de ligação de oxigénio hemoglobina e mioglobina