Sir,
În ultima vreme, nivelul optim al hematocritului (Hct) care minimizează riscul cardiovascular la pacienții renali a fost un subiect de dezbatere , cu studii care au dat rezultate aparent contradictorii. Monitorizarea precisă și reproductibilă a gradului de anemie de către laborator este esențială pentru a se putea face comparații valide între datele generate în diferite centre renale.
În mod tradițional, anemia bolii renale a fost monitorizată și gestionată exclusiv cu ajutorul Hct, dar hemoglobina (Hb) este considerată la fel de utilă și aceste teste au fost utilizate în mod interschimbabil. Am fost preocupați de rapoartele privind acuratețea relativă a Hct pentru depistarea anemiei și am finalizat unele comparații ale valorilor Hct analizate prin diferite metode. Toate probele de sânge au fost recoltate în acid dipotasic-etilendiaminotetraacetic (K2EDTA) și au fost analizate în termen de 5 ore de la puncția venoasă.
Am comparat inițial valorile Hb și Hct din 46 de probe proaspete de sânge pentru diagnosticare, folosind citometrul nostru „în casă” Coulter STKS (Coulter Electronics, Hialeah, FL) și, de asemenea, citometrul H2 (Technicon Instruments Corp). Toate citometrele calculează Hct în mod indirect, estimând mai întâi electronic volumul celular mediu (MCV), dar STKS și H2 utilizează principii de funcționare diferite: principiul popular al impedanței de dimensionare a celulelor și, respectiv, tehnologia mai recentă de împrăștiere a luminii cu două unghiuri pe eritrocite cu sferă izo-volumetrică. Ambele citometre au fost calibrate conform recomandărilor producătorilor.
Nivelurile Hct din hemogramă măsurate la solicitări secvențiale de diagnosticare cu ajutorul STKS (0,396±0,081, medie±SD) au variat de la 0,255 la 0,567 și au fost semnificativ diferite de cele obținute cu ajutorul instrumentului Technicon H2 (0,416±0,080) atunci când au fost analizate prin testul t împerecheat (P<0,0001). Concentrațiile Hb concomitente ale acelorași probe, (13,9±3,0 și, respectiv, 13,6±3,1) nu au fost semnificativ diferite (P=>0,17).
Apoi am comparat valorile automate ale Hct (STKS Coulter) cu o metodă manuală de centrifugare a microhematocritului și cu o metodă de diluție radioizotopică în care am folosit albumină serică umană iodată (125I). Metoda microhematocritului a fost un standard aprobat de National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Lungimile coloanelor de globule roșii microcapilare pentru fiecare probă de sânge au fost măsurate cu precizie (n=5, CV% <2) prin microscopie. Probele de sânge (n=121) au fost selectate pentru a avea o gamă largă de valori Hct (0,215-0,664) prin STKS și 60 dintre acestea au fost microcitice (MCV <80 fl). Valorile Hct obținute au fost de 0,438±0,105 (medie±SD) pentru analiza prin centrifugare, 0,403±0,107 pentru metoda citometrică automată și 0,421±0,113 pentru metoda de analiză prin diluție izotopică. Rezultatele celor trei metode au fost semnificativ diferite prin testul t împerecheat (P<0,0001), iar diferențele sunt exprimate în tabelul 1.
Valorile hematocritului măsurate folosind o metodă de referință a microhematocritului prin centrifugare și Coulter STKS sunt comparate cu o metodă de diluție izotopică
Haematocritul | (n) | Mediile și diferențele procentuale față de valorile izotopice ale hematocritului | ||||
Regim | Mediile metodei izotopice | Mediile metodei manuale | Mediile metodei manuale (% diferență) | Mediile metodei Coulter STKS (% diferență) | ||
<0.3 | 0.267 | 24 | 0.292 (+11.8%) | 0.256 (-3%) | ||
0.3-0.4 | 0.352 | 27 | 0.376 (+6.8%) | 0.329 (-6.5%) | ||
0.4-0.5 | 0.462 | 40 | 0.477 (+3.3%) | 0.446 (-3.5%) | ||
>0.5 | 0,561 | 30 | 0,559 (-0,4%) | 0,532 (-5,2%) | ||
Total | 0.421 | 121 | 0.438 (+4.0%) | 0.403 (-4.3%) |
Haematocrit | (n) | Mediile și diferențele procentuale față de valorile izotopice ale hematocritului | . | |||
Ranj | Mediile metodei izotopice | Mediile metodei manuale (% diferență) | Mediile metodei Coulter STKS (% diferență) | |||
<0.3 | 0.267 | 24 | 0.292 (+11.8%) | 0.256 (-3%) | ||
0.3-0.4 | 0.352 | 27 | 0.376 (+6.8%) | 0.329 (-6.5%) | ||
0.4-0.5 | 0.462 | 40 | 0.477 (+3.3%) | 0.446 (-3.5%) | ||
>0.5 | 0.561 | 30 | 0.559 (-0.4%) | 0.532 (-5,2%) | ||
Total | 0,421 | 121 | 0,438 (+4,0%) | 0,403 (-4.3%) |
+ Indică o supraestimare; – Indică o subestimare
Valorile hematocritului măsurate folosind o metodă de referință a microhematocritului prin centrifugare și Coulter STKS sunt comparate cu o metodă de diluție izotopică
Haematocrit | (n) | Mediile și diferențele procentuale față de valorile izotopice ale hematocritului | ||||
Regim | Mediile metodei izotopice | Mediile metodei manuale | Mediile metodei manuale (% diferență) | Mediile metodei Coulter STKS (% diferență) | ||
<0.3 | 0.267 | 24 | 0.292 (+11.8%) | 0.256 (-3%) | ||
0.3-0.4 | 0.352 | 27 | 0.376 (+6.8%) | 0.329 (-6.5%) | ||
0.4-0.5 | 0.462 | 40 | 0.477 (+3.3%) | 0.446 (-3.5%) | ||
>0.5 | 0.561 | 30 | 0.559 (-0.4%) | 0,532 (-5,2%) | ||
Total | 0,421 | 121 | 0,438 (+4,0%) | 0,403 (-4.3%) |
Haematocrit | (n) | Mediile și diferențele procentuale față de valorile izotopice ale hematocritului | . | |||
Ranj | Mediile metodei izotopice | Mediile metodei manuale (% diferență) | Mediile metodei Coulter STKS (% diferență) | |||
<0.3 | 0.267 | 24 | 0.292 (+11.8%) | 0.256 (-3%) | ||
0.3-0.4 | 0.352 | 27 | 0.376 (+6.8%) | 0.329 (-6.5%) | ||
0.4-0.5 | 0.462 | 40 | 0.477 (+3.3%) | 0.446 (-3.5%) | ||
>0.5 | 0,561 | 30 | 0,559 (-0,4%) | 0,532 (-5,2%) | ||
Total | 0.421 | 121 | 0.438 (+4.0%) | 0.403 (-4.3%) |
+ Indică supraestimarea; – Indică subestimarea
Motivele tehnice ale specificității metodei pentru valorile Hct sunt complexe . Pe scurt, citometrele nu sunt dispozitive de măsurare directă, ci comparatoare care sunt calibrate folosind celule normale. Pot apărea erori în dimensionarea electronică a eritrocitelor cu deficit de fier deoarece membranele celulare sunt mai puțin flexibile și hemoglobina celulară medie (MCH) este redusă în comparație cu cea normală . Variații considerabile ale Hct au fost observate anterior în probele de sânge renal folosind citometre cu principii de funcționare diferite . Dimensiunile unor astfel de celule anormale sunt întotdeauna supraestimate cu ajutorul metodelor tradiționale de centrifugare din cauza creșterii volumului de plasmă prins în coloana de globule roșii (tabelul 1) și necesită ajustare. Am considerat că abordarea izotopică, deși plictisitoare, ar da cea mai precisă (100%) măsură a volumului eritrocitar (tabelul 1).
Pe de altă parte, concentrațiile de Hb sunt măsurate direct folosind metode colorimetrice simple, care sunt comune tuturor analizelor, atât manuale cât și automate. Măsurarea hemoglobinei este calibrată cu exactitate și precizie folosind metoda de referință a cianometahemoglobinei, pentru care sunt disponibile preparate de referință internaționale. Considerăm că Hb este superioară Hct pentru monitorizarea anemiei datorită disponibilității acestor preparate standard de referință internaționale și datorită caracterului direct și simplității metodologiei de analiză. Nu există astfel de standarde de referință pentru măsurarea Hct, iar rezultatele Hct sunt specifice metodei. Acest aspect este subliniat de faptul că preparatele comerciale de control al calității sângelui pentru calibrarea citometrelor, cum ar fi CBC-Tech (R and D Systems, Inc, Minneapolis, MN), oferă tabele cu valorile țintă ale Hct (și MCV) care sunt specifice metodei (sau instrumentului) și semnificativ diferite; valorile țintă corespunzătoare ale Hb sunt practic identice.
Un avantaj suplimentar al Hb pentru monitorizarea anemiei este stabilitatea sa relativă după puncția venoasă. Valorile Hct vor crește odată cu vârsta probei de sânge din cauza absorbției de lichid extracelular, în timp ce nivelurile de Hb nu vor crește. Acest aspect a fost evidențiat în studiul multicentric publicat recent privind hematocritul normal în America de Nord, în care probele de sânge au fost procesate într-un laborator central, iar valorile Hct pentru probele primite (unele îmbătrânite) au fost derivate din valorile Hb prin înmulțirea cu 3, astfel încât să se elimine supraestimările Hct.
Mesajul important pentru nefrologi este că Hb este întotdeauna superioară Hct pentru monitorizarea anemiei bolii renale, deoarece poate fi măsurată cu o mai mare precizie atât în cadrul laboratoarelor, cât și între acestea. Hemoglobina și Hct sunt ambele corelații excelente ale anemiei și se corelează bine una cu cealaltă. Cu toate acestea, rezultatele Hct sunt specifice metodei, în timp ce rezultatele Hb nu sunt. În plus, deficitul de fier poate amplifica discrepanțele dintre rezultatele diferitelor tehnici de măsurare a Hct. Măsurătorile hemoglobinei sunt la fel de puțin influențate de variabile precum starea de hidratare a pacienților renali ca și de forma globulelor roșii. În consecință, monitorizarea Hb permite un control mai fin în managementul clinic al pacienților renali individuali și ar trebui să faciliteze realizarea unor comparații valide între datele clinice generate în diferite centre renale.
Besarab A, Kline Bolton W, Browne JK et al. The effects of normal as opposed to low hematocrit values in patients with cardiac disease who are receiving hemodialysis and epoietin.
;
:
-590
Normalizarea hemoglobinei: de ce nu? Raportul atelierului de lucru al președinților.
;
:
-79
Macdougall IC și Ritz E. The normal haematocrit trial in dialysis patients with cardiac disease: are we are any less confused about target haemoglobin?
;
:
-3033
Keen ML. Hemoglobina și hematocritul: o analiză a acurateței clinice.
;
:
-86
National Committee for Clinical and Laboratory Standards.
. Villanova, PA: NCCLS,
(NCCLS document H7-A2)
England JM și Down MC. Determinarea volumului celular ambalat utilizând 131I-albumina serică umană.
;
:
-370
Paterakis GS, Laoutaris NP, Alexia SV et al. The effect of red cell shape on the measurement of red cell volume. O metodă propusă pentru evaluarea comparativă a acestui efect între diferite analizoare de hematologie.
;
:
-245
National Committee for Clinical Laboratory Standards. Standard aprobat.
. Villanova, PA: NCCLS,
. (NCCLS approved standard H-15 A)
.