Scopul experimentului este de a observa enzima amilază în medii diferite și de a detecta fiecare mediu în parte, ajutându-se de schimbările de culoare. Enzimele sunt molecule biologice care catalizează multe reacții chimice diferite. Cu câteva excepții, toate enzimele sunt proteine și fiecare enzimă este specifică unei anumite reacții chimice. Enzimele trebuie să mențină o structură tridimensională specifică pentru a funcționa corect. Dacă structura unei enzime este alterată (prin căldură sau substanțe chimice dure), este posibil ca aceasta să nu mai funcționeze deloc. Această deteriorare (denaturare) a structurii unei enzime poate fi fatală
Dacă aveți nevoie de asistență pentru redactarea eseului, serviciul nostru profesionist de redactare a eseurilor este aici pentru a vă ajuta!
Aflați mai multe
Enzima amilază
Amilaza, care se găsește în mod obișnuit în salivă și în semințele care germinează. Aceasta catalizează descompunerea amidonului. Când amilaza reacționează cu amidonul, taie dizaharida maltoză (două molecule de glucoză legate între ele). Pe măsură ce reacția avansează, va fi prezent mai puțin amidon și mai mult zahăr (maltoză).Activitatea amilazei poate fi observată cu ajutorul iodului.Deoarece iodul reacționează cu amidonul pentru a forma o culoare maro închis/violet. Pe măsură ce amilaza descompune amidonul, va fi prezent din ce în ce mai puțin amidon și culoarea soluției (dacă se adaugă iod) va deveni din ce în ce mai deschisă. Schimbarea de culoare a fost observată cu ajutorul unor plăci spot, așa cum este ilustrat în diagrama de mai jos.
Activitatea amilazei a fost observată în patru tratamente diferite:
efectul temperaturii
efectul pH-ului
efectul concentrației de substrat
efectul concentrației de enzimă
Efectele temperaturii
Amilaza este o enzimă metabolică importantă. Funcția sa este de a cataliza hidroliza amidonului în glucoză. La temperaturi ridicate, amilaza se denaturează, amilaza denaturată nu mai catalizează hidroliza amidonului în glucoză.
EFECTUL pH-ului:
Pe baza acestor rezultate, care este pH-ul optim pentru amilază? Acest pH optim este considerat acid, bazic/alcalin sau neutru? De ce scade activitatea atunci când pH-ul este prea mic sau prea mare?
APPARATUS
Amidon
Enzima amilază
-KH2P04
-Na2HP04
-HCI
-…Încălzitor
-Beker
-Tubul Falcon
-Spectrofotometru
-Iod
PROCEDURA
1.0,27 g KH2P04 soluție tampon PH 5 s-a preparat cu 20ml
2.0,27g KH2P04 PH6 s-a preparat cu 20ml
3.0.27g KH2P04 PH7 a fost preparat cu 100ml
4.0.282g Na2HPO4 PH8 a fost preparat cu 20ml
5.0.282g Na2HP04 PH9 a fost preparat cu 20ml
6.20g Amidon a fost de asemenea preparat cu 50ml apă rece
7. Pentru a testa activitatea amilazei cu diferența de PH,5ml de amidon ,5ml de tampon (se folosește fiecare PH5,6,7,7,8,9) și 1ml de amilază au fost amestecate între ele.
8.10min mai târziu,0,5ml de probă preparată a fost pusă în 5ml de HCI.
9.La 620nm,rezultatele au fost măsurate la spectrofotometru.
10. A doua parte efectul temperaturii,5ml amidon ,5ml tampon PH7 și 1ml amilază au fost amestecate.
11.Proba preparată a fost pusă la diferite temperaturi 30,50,70 și 90C.
12.10 min mai târziu,5ml HCI a fost pus în 0,5ml probă preparată.
13.2-3 min mai târziu,5ml de iod a fost adăugat în 0,5ml de probă nouă
14.Absorbția fiecăruia a fost măsurată la spectrofotometru.
Observații
În acest experiment,am încercat să creăm un mediu diferit pentru a examina activitatea enzimei amilază.Diferențele de mediu ar putea fi furnizate de diferențele de PH.Prin urmare, am pregătit medii diferite, de asemenea, pH-uri diferite.K2.Graficul a fost obținut din rezultatele noastre.Unul dintre ele este un grafic care se referă la activitatea amilazei la diferite PH.Celălalt se referă la activitatea amilazei la diferite temperaturi la PH constant.Cu K2HPO4 s-au preparat PH 5,6și 7 și cu Na2PO4 8și 9.Fiecare procedură de preparare a fost aplicată.5ml de amidon, 5 ml de tampon și 1 ml de amilază au fost adăugate reciproc și apoi s-a așteptat 10 minute.După 10 minute, 5 ml de HCI au fost adăugate în 0,5 ml de amestec de probă.În același mod, amestecul pentru observarea temperaturii a fost preparat la pH 7.Și s-a adăugat iod la sfârșitul procedurii. Rezultatele absorbției au fost luate din spectrofotometrie.această măsurătoare a fost la 620nm.
Eșantionul de tampon pH cu amilază
Conform rezultatelor,
Cel mai mic poate fi considerat ca fiind cel mai bun.Cât de multă enzimă este folosită este un punct mai esențial.Dacă este mai puțină, înseamnă că amidonul nu poate fi folosit în mod adecvat.Cantitatea mare de amidon înseamnă că și cantitatea de complex este mare.Cel opus arată cea mai bună activitate a amilazei la cea mai mică concentrație.Culoarea este mai deschisă, o absorbție mai mică poate fi considerată ca fiind cea mai bună activitate a amilazei.
Eșantionul de temperatură cu amilază
La 30C culoarea este ușor portocalie.
La 50C culoarea este foarte deschisă ca și culoarea iodului.
La 70C culoarea este ușor violacee.
La 90C culoarea este mai purpurie decât la 30C ca portocaliu-violet.La PH constant, concentrația mică, la 50C.Pentru că absorbția mică formată de complexul mic.Înseamnă că a scăzut și cantitatea de amidon.Cea mai bună activitate este la 50C la PH constant.
Experții noștri academici sunt gata și așteaptă să te ajute cu orice proiect de scriere pe care l-ai putea avea. De la simple planuri de eseuri, până la disertații complete, puteți garanta că avem un serviciu perfect adaptat nevoilor dumneavoastră.
Vezi serviciile noastre
REZULTATE
Obiectivul nostru este de a fi legat de activitatea amilazei. pentru a o detecta, am preparat diferite PH din KHP04 și Na2HP04 prin adăugarea de acid sau bază. După ce am preparat tamponul, am măsurat absorbanța la spectrofotometrie.La PH-uri diferite, absorbanța dă, de asemenea, concentrații diferite.Dacă concentrația enzimei amilazei cu proba este mică, înseamnă că enzima folosită este un complex mai mic, astfel încât activitatea enzimei este cea mai bună.La PH-uri diferite, cea mai mică concentrație este la PH 7.Și apoi am făcut a doua parte a experimentului folosind PH7.Alegerea PH7 este legată de observarea celei mai bune activități a amilazei în prima parte.La PH7 am luat o probă cu concentrația enzimei amilazei la diferite PH.Cea mai mică concentrație este la 50C în a doua parte.Concentrația este de 0,006.Amidonul este folosit împreună cu amilaza și, prin urmare, culoarea complexă este de asemenea mai deschisă.Activitatea enzimei amilază este cea mai bună la 50C.Această măsurătoare se face la 620nm.
DISCUȚII ȘI CONCLUZII
De ce se măsoară la 620nm? De ce se folosește HCI pentru preparare ? Ce înseamnă culoarea deschisă la culoare?Cum afectează rxn mai multă căldură? În timpul experimentului ,dorim să distingem scopul experimentului răspunzând la aceste întrebări.În acest experiment,ne-am legat de efectul diferitelor tampoane și temperaturi.Am pregătit tampoane la diferite PH.KH2P04 a fost preparat pentru PH 5 ,6 ,7și Na2HP04 pentru 8și 9.În prima parte ,la temperatură constantă (temperatura camerei) s-a măsurat proba cu concentrația de amilază.La PH 7, am măsurat cea mai mică concentrație.Concentrația mică înseamnă mai puțin complex, mai puțin amidon și enzima este folosită, activitatea enzimatică este ridicată.Rezultatul nostru de la măsurarea la PH 7 este 0,026.În a doua parte, PH constant, temperatura a fost schimbată și apoi s-a observat efectul acesteia.La 50 C, a fost găsită cea mai mică absorbție ( 0,0060 ) și culoarea a fost foarte deschisă.Aceasta înseamnă că există mai puțin complex.În acest experiment, iodul este folosit pentru a detecta moleculele de amidon prin observarea modificării culorii.Iodul și amidonul au fost combinate și apoi au format un complex.Un alt punct este de ce se folosește HCI.Acidul oprește reacția enzimatică și iodul reacționează cu amidonul pentru a produce culoarea albastră.Activitatea enzimei este, de asemenea, esențială.Poate fi folosită pentru detectarea denaturării.Amidonul reacționează cu iodul care este galben pentru a forma un compus albastru Amax=620nm.Intensitatea culorii albastre poate fi cuantificată spectrofotometric prin măsurarea absorbanței sale la 620nm.
.