O investigație asupra cineticii și proprietăților de reglare ale fosfofructokinazei de tip-1 fosfofructokinază (PFK) de la termofilul extrem Thermus thermophilus (TtPFK) relevă o enzimă care este inhibată de PEP și activată de ADP prin modificarea afinității manifestate pentru substratul fructoză 6-fosfat (Fru-6-P) într-un mod analog cu alte PFK procariote. Cu toate acestea, TtPFK se leagă de ambii liganzi alosterici mult mai strâns decât alte PFK bacteriene, realizând în același timp un grad de inhibiție sau de activare mult mai modest la 25 °C, ceea ce întărește principiul conform căruia afinitatea de legare și eficacitatea pot fi independente și necorelate între ele. Aceste proprietăți ne-au permis să stabilim în mod riguros că PEP inhibă numai prin antagonizarea legăturii Fru-6-P și nu prin influențarea cifrei de afaceri, o concluzie care necesită determinarea kcat în condiții în care atât inhibitorul, cât și substratul se saturează simultan. În plus, dependența de temperatură a efectelor alosterice asupra legării Fru-6-P indică faptul că energiile libere de cuplare sunt dominate de entropie, așa cum s-a observat anterior pentru PFK din Bacillus stearothermophilus, dar nu și pentru PFK din Escherichia coli, susținând ipoteza că efectele alosterice dominate de entropie pot fi o caracteristică a enzimelor derivate din organisme termostabile. Pentru astfel de enzime, cauza principală a efectului alosteric poate să nu fie ușor de distins din informațiile structurale statice, cum ar fi cele obținute din cristalografia cu raze X.
.