De National Library of Medicine biedt al lange tijd programma’s en diensten voor professionele medische wetenschappers en zorgverleners, waaronder MEDLINE en de verschillende diensten die hiertoe toegang geven, zoals PubMed en Entrez. Tegen de jaren 90 maakten meer leden van het grote publiek gebruik van deze diensten omdat toegang tot het Internet wijdverspreid werd. Maar niet-professionele gebruikers konden profiteren van betrouwbare gezondheidsinformatie in een voor leken toegankelijk formaat. De National Library of Medicine introduceerde MedlinePlus in oktober 1998, om een niet-commerciële online dienst aan te bieden die bijvoorbeeld vergelijkbaar is met het commerciële WebMD. In 2010 vulde een andere NCBI-dienst, PubMed Health, MedlinePlus aan met gecureerde gezondheidsinformatie voor consumenten; PubMed Health richt zich met name op het vinden van informatie over de klinische effectiviteit van behandelingen.
MedlinePlus bood aanvankelijk 22 gezondheidsonderwerpen in het Engels, wat uitgroeide tot bijna 1000 gezondheidsonderwerpen in het Engels en Spaans, plus links naar gezondheidsinformatie in meer dan 40 talen. MedlinePlus werd erkend door de Medical Library Association voor zijn rol in het verstrekken van gezondheidsinformatie. De site scoorde 84 in de Amerikaanse Customer Satisfaction Index voor 2010.
In de jaren 2000 werd de medische encyclopedie van A.D.A.M. opgenomen in MedlinePlus. De “Animated Dissection of Anatomy for Medicine, Inc” is een NASDAQ verhandeld beursgenoteerd bedrijf gevestigd in Atlanta, Georgia, dat informatie over de gezondheid van de consument en voordelen technologische producten levert aan organisaties in de gezondheidszorg, werkgevers, consumenten, en onderwijsinstellingen.