Middlesex, county, noordoostelijk van Massachusetts, V.S., ten westen en noordwesten van Boston en in het noorden begrensd door New Hampshire. Het graafschap bestaat uit een hooglandgebied dat wordt afgevoerd door de rivieren Merrimack, Nashua, Assabet, Concord, Sudbury en Shawsheen. Andere waterwegen zijn Whitehall en Cambridge reservoirs, Lake Cochituate, en het historische Walden Pond. Tot de parken behoren meer dan 20 staats- en federale locaties, met name Townsend en Willard Brook staatsbossen, Hopkinton en Cochituate staatsparken, en Minute Man National Historical Park.
Middlesex werd in mei 1643 opgericht als een van de drie oorspronkelijke graafschappen van Massachusetts en werd vernoemd naar Middlesex, Engeland. De hoofdplaats van de county is Cambridge, waar de Harvard University (opgericht in 1636) en het Massachusetts Institute of Technology (1861) gevestigd zijn. Andere instellingen voor hoger onderwijs zijn Boston College (1863) in Chestnut Hill-Newton, Tufts University (1852) in Medford, en Bentley College (1917) en Brandeis University (1948) in Waltham. Lowell, in het noorden, is de eerste geplande industriële gemeenschap van het land (stad met rechtspersoonlijkheid, 1826). Lexington en Concord, verbonden door Battle Road, waren de eerste slagvelden van de Amerikaanse Onafhankelijkheidsoorlog. Verscheidene opmerkelijke 19e-eeuwse schrijvers woonden in het graafschap: Henry Wadsworth Longfellow, Nathaniel Hawthorne, Ralph Waldo Emerson, Henry David Thoreau, en Louisa May Alcott.
Steden als Somerville, Everett, Woburn, Malden, Marlborough en Melrose zorgen ervoor dat Middlesex tot de 20 dichtstbevolkte graafschappen van de Verenigde Staten behoort. Het is ook een van de belangrijkste industrieregio’s van het land. De belangrijkste economische activiteiten zijn textielproductie, landbouw en high-tech bedrijven, met name lucht- en ruimtevaart en defensie. Oppervlakte 2.133 km². Bevolking. (2000) 1,465,396; (2010) 1,503,085.