Het doel van dit experiment is het observeren van amylase-enzym in verschillende omgevingen en het detecteren van elke omgeving door te helpen bij kleurveranderingen. Enzymen zijn biologische moleculen die veel verschillende chemische reacties katalyseren. Op enkele uitzonderingen na zijn alle enzymen eiwitten en elk enzym is specifiek voor een bepaalde chemische reactie. Enzymen moeten een specifieke driedimensionale structuur behouden om goed te kunnen functioneren. Als de structuur van een enzym wordt gewijzigd (door hitte of agressieve chemicaliën), kan het helemaal niet meer functioneren. Deze afbraak (denaturatie) van de structuur van een enzym kan fataal zijn
Als je hulp nodig hebt bij het schrijven van je essay, staat onze professionele essayschrijfdienst voor je klaar!
Meer informatie
Amylase Enzym
Amylase, dat veel voorkomt in speeksel en ontkiemende zaden. Het katalyseert de afbraak van zetmeel. Wanneer amylase reageert met zetmeel, snijdt het de disacharide maltose (twee aan elkaar gekoppelde glucosemoleculen) af. Naarmate de reactie vordert, zal er minder zetmeel aanwezig zijn en meer suiker (maltose).De activiteit van amylase kan worden waargenomen door jodium te gebruiken.Omdat jodium met zetmeel reageert, ontstaat er een donkerbruine/paarse kleur. Naarmate amylase zetmeel afbreekt, zal er steeds minder zetmeel aanwezig zijn en zal de kleur van de oplossing (als jodium is toegevoegd) steeds lichter worden. De kleurverandering werd waargenomen met behulp van spot-plates, zoals geïllustreerd op het onderstaande diagram.
Amylase-activiteit werd waargenomen onder vier verschillende behandelingen:
effect van temperatuur
effect van pH
effect van substraatconcentratie
effect van enzymconcentratie
De effecten van temperatuur
Amylase is een belangrijk stofwisselingsenzym. Zijn functie is het katalyseren van de hydrolyse van zetmeel tot glucose. Bij hoge temperaturen wordt amylase gedenatureerd, gedenatureerd amylase katalyseert niet langer de hydrolyse van zetmeel tot glucose.
EFFECT VAN pH:
Gebaseerd op deze resultaten, wat is de optimale pH voor amylase? Wordt deze optimale pH beschouwd als zuur, basisch/alkalisch, of neutraal? Waarom neemt de activiteit af als de pH te laag of te hoog is?
APPARATUS
-Starch
-Amylase Enzyme
-KH2P04
-Na2HP04
-HCI
-Verwarmer
-Beker
-Falconbuis
-Spectrofotometer
-Jodium
PROCEDURE
1.0,27 g KH2P04 bufferoplossing PH 5 werd bereid met 20ml
2,0,27 g KH2P04 PH6 werd bereid met 20ml
3,0.27g KH2P04 PH7 werd bereid met 100ml
4.0.282g Na2HPO4 PH8 werd bereid met 20ml
5.0.282g Na2HP04 PH9 werd bereid met 20ml
6.20g Zetmeel werd ook bereid met 50ml koud water
7. Om amylaseactiviteit met PH verschil te testen, werden 5ml zetmeel, 5ml buffer (PH5,6,7,8,9 wordt gebruikt elk) en 1ml amylase gemengd elkaar.
8.10min later, werd 0.5ml voorbereid steekproef gezet in 5ml HCI.
9.At 620nm, werden de resultaten gemeten bij spectrofotometer.
10. Het tweede deel temperatuureffect, 5ml zetmeel, 5ml PH7 buffer en 1ml amylase werd mixed.
11.Prepared steekproef werd gezet in verschillende temperatuur 30,50,70 en 90C.
12.10 min later, werd 5ml HCI gezet in 0.5 ml voorbereide steekproef.
13.2-3 min later, werd 5ml jodium toegevoegd aan 0.5ml nieuw monster.
14.Absorbantie van elk werd gemeten bij spectrofotometer.
OBSERVATIES
In dit experiment, probeerden wij verschillende milieu’s te creëren om amylase-enzymactiviteit te onderzoeken.De omgevingsverschillen kunnen worden veroorzaakt door PH-verschillen.Daarom hebben we verschillende mediums bereid met verschillende pH’s.K2.De grafiek is verkregen uit onze resultaten.Een van hen is een grafiek die betrekking heeft op amylase activiteit bij verschillende PH.De andere is gerelateerd aan amylase activiteit bij verschillende temperaturen bij constante PH.Met K2HPO4 PH 5,6en 7 werden bereid en met Na2PO4 8en 9.Elke bereidingsprocedure werd toegepast.5ml zetmeel, 5 ml buffer, 1 ml amylase werden aan elkaar toegevoegd en vervolgens 10 min gewacht.Na 10min werd 5 ml HCI toegevoegd aan 0,5 ml monstermengsel.Op dezelfde manier werd het mengsel voor temperatuurwaarneming bereid pH 7.En jodium toegevoegd aan het einde van de procedure. Absorbantie resultaten werden genomen van spectrofotometrie.Deze meting was bij 620nm.
pH buffer monster met amylase
Volgens de resultaten,
De kleinste kan worden beschouwd als een beste.Hoeveel enzym wordt gebruikt is meer essentieel punt.Als het minder is, betekent dit dat zetmeel niet adequaat kan worden gebruikt. Hoge zetmeel hoeveelheid betekent dat complexe hoeveelheid ook hoog is. De tegenovergestelde toont de beste activiteit amylase bij de kleinste concentratie. De kleur is meer licht, kleinere absorptie kan worden gedacht als de beste amylase activiteit.
Temperatuur monster met amylase
Bij 30C is de kleur licht oranje.
Bij 50C is de kleur extra licht zoals jodiumkleur.
Bij 70C is de kleur licht paars.
Bij 90C is de kleur paarser dan bij 30C zoals oranje-paars.Bij constante PH, de kleine concentratie, bij 50C.Omdat kleine absorptie gevormd door kleine complex.Het betekent dat hoeveelheid zetmeel was ook verminderd.Beste activiteit is 50C bij constante PH.
Onze academische experts staan klaar om u te helpen bij elk schrijfproject dat u hebt. Van eenvoudige essay plannen, door middel van volledige proefschriften, kunt u garanderen dat we hebben een dienst perfect afgestemd op uw behoeften.
Bekijk onze diensten
RESULTATEN
Ons doel is te worden gerelateerd aan de activiteit van amylase.Om het te detecteren, hebben we bereid verschillende PH van KHP04 en Na2HP04 door toevoeging van zuur of base. Het gebruik van beide is gerelateerd aan het interval van de buffer. Na de bereiding van de buffer meten we de absorptie bij spectrofotometrie. Bij verschillende PH geeft de absorptie ook verschillende concentraties. Als de concentratie van het amylase-enzym in het monster klein is, betekent dit dat het gebruikte enzym complex kleiner is, zodat de activiteit van het enzym het beste is. Bij verschillende PH’s is de kleinste concentratie bij PH 7. En toen hebben we het tweede deel van het experiment gedaan met PH7.De keuze van PH7 houdt verband met de waarneming van de beste amylaseactiviteit in het eerste deel. Bij PH7 namen we monsters met amylase-enzymconcentratie bij verschillende PH’s. De kleinste concentratie is bij 50C in het tweede deel. De concentratie is 0,006.De kleur is lichter zoals jodiumkleur.Zetmeel wordt gebruikt met amylase en daarom is de complexe kleur ook lichter.De amylase enzymactiviteit is het best bij 50C.Deze meting wordt gedaan bij 620nm.
DISCUSSIE EN CONCLUSIE
Waarom wordt gemeten bij 620nm ? Waarom HCI wordt gebruikt voor voorbereiding? Wat betekent Lichte kleur? Hoe beïnvloedt meer hitte Rusn? Tijdens het experiment willen we het doel van het experiment onderscheiden door deze vragen te beantwoorden. In dit experiment hebben we gekeken naar het effect van verschillende buffers en temperatuur. We hebben buffers met verschillende PH voorbereid. KH2P04 werd bereid voor PH 5,6,7 en Na2HP04 voor 8 en 9. In het eerste deel werd bij constante temperatuur (kamertemperatuur) een monster met amylaseconcentratie gemeten.Bij PH 7,hebben we de kleinste gemeten.Kleine concentratie betekent minder complex minder zetmeel en enzym wordt gebruikt enzymactiviteit is hoog.Ons resultaat van de meting bij PH 7 is 0.026.Als een tweede deel,constante PH,temperatuur werd veranderd en vervolgens waargenomen het effect van het.Bij 50°C werd de kleinste extinctie (0,0060) gevonden en de kleur was extra licht. Dit betekent dat er minder complex is. In dit experiment wordt jodium gebruikt om zetmeelmoleculen te detecteren door kleurverandering waar te nemen. Jodium en zetmeel werden gecombineerd en vormden een complex. Een ander punt is waarom HCI wordt gebruikt.Het zuur stopt de enzymatische reactie en jodium reageert met zetmeel om blauwe kleur te produceren.Activiteit van enzym is ook essentieel.Het kan worden gebruikt voor denaturatie detectie.Zetmeel reageert met jodium dat geel is om blauwe verbinding te vormen Amax=620nm.De intensiteit van de blauwe kleur kan spectrofotometrisch worden gekwantificeerd door het meten van de absorptie bij 620nm.