Celem eksperymentu jest obserwacja enzymu amylazy w różnych środowiskach i wykrycie każdego środowiska poprzez pomoc w zmianie koloru. Enzymy są cząsteczkami biologicznymi, które katalizują wiele różnych reakcji chemicznych. Z kilkoma wyjątkami, wszystkie enzymy są białkami, a każdy enzym jest specyficzny dla określonej reakcji chemicznej. Enzymy muszą zachować specyficzną trójwymiarową strukturę, aby funkcjonować prawidłowo. Jeśli struktura enzymu zostanie zmieniona (przez ciepło lub ostre chemikalia), może on w ogóle nie funkcjonować. Ten rozpad (denaturacja) struktury enzymu może być śmiertelny
Jeśli potrzebujesz pomocy w pisaniu eseju, nasz profesjonalny serwis pisania esejów jest tutaj, aby pomóc!
Dowiedz się więcej
Amylaza Enzym
Amylaza, która jest powszechnie spotykana w ślinie i kiełkujących nasionach. Katalizuje ona rozkład skrobi. Kiedy amylaza reaguje ze skrobią, odcina disacharyd maltozę (dwie połączone ze sobą cząsteczki glukozy). W miarę postępu reakcji, mniej skrobi będzie obecne i więcej cukru (maltoza) będzie obecny.Aktywność amylazy można obserwować za pomocą jodu.Ponieważ jod reaguje ze skrobią, tworząc ciemny brązowy / fioletowy kolor. Ponieważ amylaza rozkłada skrobię, coraz mniej skrobi będzie obecne, a kolor roztworu (jeśli dodano jod) będzie coraz jaśniejszy. Zmianę barwy obserwowano przy użyciu płytek punktowych, jak pokazano na poniższym schemacie.
Aktywność amylazy obserwowano w czterech różnych warunkach:
wpływ temperatury
wpływ pH
wpływ stężenia substratu
wpływ stężenia enzymu
Wpływ temperatury
Amylaza jest ważnym enzymem metabolicznym. Jej funkcją jest katalizowanie hydrolizy skrobi do glukozy. W wysokich temperaturach amylaza ulega denaturacji, zdenaturowana amylaza nie katalizuje już hydrolizy skrobi w glukozę.
Wpływ pH:
W oparciu o te wyniki, jakie jest optymalne pH dla amylazy? Czy to optymalne pH jest uważane za kwaśne, zasadowe/alkaliczne, czy obojętne? Dlaczego aktywność spada, gdy pH jest zbyt niskie lub zbyt wysokie?
APPARATUS
skrobia
enzym amylazy
-KH2P04
-Na2HP04
-HCI
-.Grzałka
-Zlewka
-Rurka Falcona
-Spektrofotometr
-Jod
PROCES
1.0,27 g KH2P04 roztworu buforowego PH 5 przygotowano z 20ml
2.0,27g KH2P04 PH6 przygotowano z 20ml
3.0.27g KH2P04 PH7 przygotowano z 100ml
4.0.282g Na2HPO4 PH8 przygotowano z 20ml
5.0.282g Na2HP04 PH9 przygotowano z 20ml
6.20g Skrobię przygotowano również z 50ml zimnej wody
7. Aby zbadać aktywność amylazy przy różnicy PH, 5ml skrobi, 5ml buforu (PH5,6,7,8,9) i 1ml amylazy zmieszano ze sobą.
8.10min później, 0,5ml przygotowanej próbki umieszczono w 5ml HCI.
9.Przy 620nm, wyniki zmierzono na spektrofotometrze.
10. Druga część wpływ temperatury,5ml skrobi,5ml buforu PH7 i 1ml amylazy zmieszano.
11.Przygotowaną próbkę umieszczono w różnych temperaturach 30,50,70 i 90C.
12.10 min później,5ml HCI umieszczono w 0,5 ml przygotowanej próbki.
13.2-3 min później,5ml jodyny dodano do 0,5ml nowej próbki
14.Absorbancja każdego z nich została zmierzona na spektrofotometrze.
OBSERWACJE
W tym doświadczeniu, staraliśmy się stworzyć różne środowisko do badania aktywności enzymu amylazy.Różnice środowiska mogą być zapewnione przez różnice PH.Dlatego przygotowaliśmy różne pożywki również różne pH.K2.Wykres został uzyskany z naszych wyników.Jeden z nich jest wykres, który odnosi się do aktywności amylazy w różnych PH.Drugi jest związany z aktywnością amylazy w różnych temperaturach przy stałym PH.Z K2HPO4 PH 5,6i 7 zostały przygotowane i z Na2PO4 8i 9.Każda procedura przygotowania została zastosowana.5ml skrobi, 5ml buforu, 1ml amylazy dodawano do siebie, a następnie odczekano 10 min. Po 10 min. do 0,5 ml mieszaniny próbek dodano 5ml HCI. W ten sam sposób przygotowano mieszaninę do obserwacji temperaturowej o pH 7 i na koniec procedury dodano jod. Wyniki absorbancji zostały pobrane ze spektrofotometrii.Ten pomiar był na 620nm.
pH bufor próbki z amylazą
Zgodnie z wynikami,
najmniejszy może być uważany za najlepszy.Ile enzym jest używany jest bardziej istotny punkt.Jeśli jest mniejsza, oznacza to, że skrobia nie może być odpowiednio wykorzystana. Wysoka ilość skrobi oznacza, że ilość kompleksu jest również wysoka. Przeciwny pokazuje najlepszą aktywność amylazy przy najmniejszym stężeniu. Kolor jest bardziej jasny, mniejsza absorbancja może być uważana za najlepszą aktywność amylazy.
Temperatura próbki z amylazą
Przy 30C barwa jest lekko pomarańczowa.
Przy 50C barwa jest bardzo jasna jak barwa jodu.
Przy 70C barwa jest lekko fioletowa.
W 90C kolor jest bardziej fioletowy niż w 30C jeden jak pomarańczowo-purpurowy.Przy stałym PH, małe stężenie, w 50C.Ponieważ mała absorbancja utworzona przez mały kompleks.Oznacza to, że ilość skrobi została zmniejszona również.Najlepsza aktywność jest 50C przy stałym PH.
Nasi akademiccy eksperci są gotowi i czekają, aby pomóc z każdym projektem pisania, który możesz mieć. Od prostych planów esejów, poprzez pełne dysertacje, możesz mieć gwarancję, że mamy usługę idealnie dopasowaną do Twoich potrzeb.
Zobacz nasze usługi
WYNIKI
Naszym celem jest być związanym z aktywnością amylazy.Aby to wykryć, przygotowaliśmy różne PH z KHP04 i Na2HP04 przez dodanie kwasu lub zasady. Po przygotowaniu buforu zmierzyliśmy absorbancję w spektrofotometrze. Przy różnym PH absorbancja daje również różne stężenie. Jeśli stężenie enzymu amylazy w próbce jest małe, oznacza to, że enzym jest używany kompleks jest bardziej mały, więc aktywność enzymu jest najlepsza.Wybrany z PH7 jest związane z obserwacją najlepszą aktywność amylazy w pierwszej części.Na PH7 wzięliśmy próbkę z enzymem amylazy stężenia w różnych PH.Najmniejsze stężenie jest w 50C w drugiej części.Stężenie jest 0,006.Skrobia jest używana z amylazą i dlatego kolor kompleksu jest bardziej jasny również.Aktywność enzymu amylazy jest najlepsza w 50C.Ten pomiar jest wykonywany przy 620nm.
DISCUSSION AND CONCLUSION
Dlaczego pomiar jest wykonywany przy 620nm ? Dlaczego HCI jest używany do przygotowania ? Co oznacza jasny kolor? Jak większa ilość ciepła wpływa na rxn? W tym eksperymencie odnieśliśmy się do wpływu różnych buforów i temperatury. Przygotowaliśmy bufory o różnym PH. KH2P04 został przygotowany dla PH 5, 6, 7 i Na2HP04 dla 8 i 9. W pierwszej części, w stałej temperaturze (temperatura pokojowa) zmierzono stężenie amylazy.Przy PH 7,zmierzyliśmy najmniejszą.Małe stężenie oznacza mniej kompleksu mniej skrobi i enzym jest używany aktywność enzymu jest wysoka.Nasz wynik z pomiaru przy PH 7 jest 0,026.Jako druga część, stałe PH, temperatura została zmieniona, a następnie obserwowano wpływ tego.W 50 C najmniejsza absorbancja ( 0,0060 ) została znaleziona i kolor był ekstra jasny.Oznacza to, że mniej kompleksu tam.W tym doświadczeniu jodyna jest używana do wykrywania cząsteczek skrobi poprzez obserwację zmiany koloru.Jodyna i skrobia zostały połączone, a następnie utworzyły kompleks.Innym punktem jest to, dlaczego HCI jest używany.Kwas zatrzymuje reakcję enzymatyczną, a jod reaguje ze skrobią, tworząc niebieski kolor.Aktywność enzymu jest również istotna.Może być stosowany do wykrywania denaturacji.Skrobia reaguje z jodem, który jest żółty, tworząc niebieski związek Amax=620nm.Intensywność niebieskiego koloru może być określona spektrofotometrycznie poprzez pomiar absorbancji przy 620nm.