Abstract
To badanie zostało zaprojektowane w celu ustalenia zakresów referencyjnych dla kwasu moczowego w surowicy wśród zdrowej dorosłej populacji Assamese. Próbki z 1470 w wieku 35-86 lat zostały wykorzystane do ustalenia wieku i płci związane zakres referencyjny metodą centyla (środkowy 95 percentyl) dla poziomu kwasu moczowego w surowicy. Było 51% () mężczyzn i 49% () kobiet; 75,9% () z nich pochodziło z obszaru miejskiego, a reszta 24,1% () pochodziła z obszaru wiejskiego. Większość badanej populacji była niewegetariańska (98,6%, ), a tylko 1,4% () było wegetarianami. Średni wiek, waga, wzrost i stężenie kwasu moczowego w badanej grupie wynosiły odpowiednio lat, kg, cm i mg/dL. Stwierdzono istotną statystycznie różnicę w średnich wartościach wyżej wymienionych parametrów pomiędzy kobietami i mężczyznami. Obserwowany zakres referencyjny kwasu moczowego w populacji wynosi 2,6-8,2 mg/dl i jest szerszy od aktualnego zakresu referencyjnego stosowanego w laboratorium. Poza płcią (), nie stwierdzono istotnego związku kwasu moczowego z innymi wybranymi czynnikami.
1. Wprowadzenie
Kwas moczowy w surowicy (SUA) jest głównym produktem końcowym metabolizmu puryn u ludzi; a poziom SUA jest rygorystycznie kontrolowany przez równowagę między produkcją i wydalaniem kwasu moczowego . Wiele wcześniejszych badań wykazało związek między hiperurykemią a różnymi chorobami układu sercowo-naczyniowego i ich czynnikami ryzyka, w tym zespołem metabolicznym (MS). Według wcześniejszych badań, nie tylko szczera hiperurykemia, ale także poziom SUA prawie w granicach normy wykazywały pozytywną korelację z MS . Ostatnie badania wykazały, że poziom SUA jest istotnie związany z niealkoholową chorobą stłuszczeniową wątroby .
Obecne „odniesienie” lub „normalny zakres” ustalony dla hiperurykemii często nie pozwala zidentyfikować pacjentów z potencjalnymi zaburzeniami metabolicznymi . Zalecane kryteria, które należy stosować przy wyborze osób jako źródła wartości referencyjnych, opis warunków gromadzenia próbek oraz terminologia statystyczna do opisu tych wartości zostały ostatnio przedstawione w medycynie ludzkiej. Podejście w opracowywaniu wartości referencyjnych zostało uznane za ważny krok w kierunku klinicznej interpretacji danych laboratoryjnych. Klinicysta musi oczywiście zważyć razem z danymi laboratoryjnymi historię, objawy kliniczne, częstość występowania choroby i tak dalej. Większość laboratoriów medycznych używane do cytowania „normalne zakresy” nie tak związane, ale idealnie wyniki badań parametrów biochemicznych powinny być odnoszone do populacji, której status jest zdefiniowany .
Zakres referencyjny danego parametru jest zdefiniowany jako stężenie tego parametru w grupie klinicznie zdrowych osób . W normalnych warunkach fizjologicznych mechanizmy hemostatyczne utrzymują te parametry w pewnych granicach . U zdrowych osób różnią się one znacznie w różnych populacjach. W płynach ustrojowych i przy braku chorób, są one pod wpływem kilku czynników, takich jak wiek, płeć, nawyki żywieniowe ludzi, położenie geograficzne i klimat. Ponadto, niektóre z tych parametrów wykazują wahania dobowe i sezonowe; podawanie leków lub szczepionek do celów terapeutycznych lub badań klinicznych może również powodować znaczne wahania. Mogą się one również zmieniać w wyniku różnic w technikach stosowanych przez różne laboratoria. Parametry mogą również zmieniać się w następstwie stanów patologicznych, które wpływają na główne narządy ciała i systemy, które je produkują, wydzielają lub przechowują, takie jak wątroba, trzustka, nerki, szpik kostny i układ odpornościowy. W chemii klinicznej, wartości referencyjne są powszechnie oparte na referencjach populacji zachodniej; zwykle nie pasują one do populacji indyjskiej. Ponieważ wartości referencyjne są wykorzystywane przez klinicystów do interpretacji wyników pomiarów, powinny one prawidłowo reprezentować określoną grupę populacji, która powinna mieć bliskie podobieństwo do leczonych pacjentów zgłaszających się do badania. Ponieważ do tej pory nie dobrze udokumentowane wartości referencyjne kwasu moczowego w populacji Assamese zostały ustalone, zaplanowaliśmy to badanie w celu oceny wartości referencyjnych kwasu moczowego indyjskiej populacji Assamese, pamiętając o potrzebie linii odniesienia laboratoryjnych zakresów, z którymi do monitorowania fizjologicznych lub patologicznych zmian.
2. Materiały i metody
2.1. Study Population
A total of 2000 subjects of different socioeconomic status from both genders were screened for inclusion in the study. Informacje wyjściowe dotyczące szczegółowej diety (wege/niewegetariańska), historii choroby i historii rodziny wraz z informacjami na temat używania tytoniu (tak/nie), napojów alkoholowych (tak/nie) i aktualnej aktywności fizycznej zostały zebrane przy użyciu standardowego kwestionariusza. Dokonano również pomiaru wzrostu i wagi, przy czym badani byli ubrani w lekki fartuch i stali boso. Badane osoby uznano za kwalifikujące się do udziału w tym badaniu, jeśli spełniały wszystkie kryteria po przeprowadzeniu niezbędnych badań przesiewowych, zgodnie z kryteriami wykluczenia podanymi w tabeli 1.
|
||||||||||||||||||
2.2. Pobieranie próbek
12-godzinne próbki krwi żylnej na czczo z EDTA, fluorkiem i skrzepem pobierano niezależnie od zmian sezonowych w ciągu całego roku. Surowica i osocze były przygotowywane przez odwirowanie przy 3000 rpm przez 15 minut, a analiza była wykonywana w ciągu 4 godzin od pobrania. Spośród 2000 analizowanych próbek, po wyeliminowaniu wyników wymienionych w tabeli 2, do badań włączono 1470.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2.3. Metoda oznaczania
Oszacowanie stężenia kwasu moczowego w surowicy wykonano w pełni zautomatyzowaną pośrednią metodą urykazową UV. Metoda ta jest modyfikacją metody urykazowej opisanej po raz pierwszy przez Bulgara i Johnsa, a następnie zmodyfikowanej przez Kalchana. Kwas moczowy, który absorbuje światło przy 293 nm jest przekształcany przez urykazę do alantoiny, która nie absorbuje światła przy 293 nm. Zmiana absorbancji przy 293 nm spowodowana zanikiem kwasu moczowego jest wprost proporcjonalna do stężenia kwasu moczowego w próbce i jest mierzona przy użyciu techniki bichromatycznego (293, 700 nm) punktu końcowego. Ta metoda oznaczania kwasu moczowego w surowicy oddzielnie określa początkową absorbancję UV roztworu reakcyjnego przed działaniem urykazy i absorbancję tła po zakończeniu reakcji urykazy w celu uzyskania absorbancji netto kwasu moczowego. Metoda UV urykazy jest odporna na powszechne endogenne interferencje, takie jak askorbinian i glutation, i jest łatwa do skalibrowania w autoanalizatorze. Te zalety sprawiają, że jest ona raz zalecana jako metoda referencyjna przez Międzynarodową Federację Chemii Klinicznej i Medycyny Laboratoryjnej (IFCC) .
2.4. Walidacja metody
Wewnętrzna walidacja metody jest wykonywana zgodnie z wytycznymi CLSI, włączając w to obliczenia precyzji, błędu systematycznego, weryfikację liniowości, czułości i interferencji testu. Precyzja i błąd systematyczny są obliczane (Tabela 3) na 20 powtórzeniach przez okres 20 dni na materiałach QC. Liniowość została zweryfikowana i metoda jest liniowa do 20 mg/dL.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Metodę oznaczania kwasu moczowego oceniano pod kątem interferencji z hemolizą, żółtaczką i lipemią zgodnie z CLSI/NCCLS EP7-P. Bias, zdefiniowany jako różnica pomiędzy próbką kontrolną (nie zawiera interferenta) a próbką badaną (zawiera interferent), jest przedstawiony w Tabeli 4. Bias przekraczający 10% jest uważany za „interferencję”.”
|
||||||||||||||||||||||
Czułość analityczna wynosi 0,01 mg/dl. Stanowi ona najniższe stężenie kwasu moczowego, które można odróżnić od zera.
2.5. Zapewnienie jakości/kontrola jakości
Aby zapewnić dokładność i precyzję wyników testu, wzięto pod uwagę wszystkie przedanalityczne, analityczne i poanalityczne środki ostrożności. Walidacja instrumentów, personelu i procedur została przeprowadzona poprzez wewnętrzny program kontroli jakości (QC) z obliczaniem odchyleń standardowych (SD) i współczynników zmienności (CV). Daje to przegląd materiału kontroli jakości użytego do oceny oznaczenia wraz z dziennym współczynnikiem zmienności. Laboratorium uczestniczyło również w zewnętrznym programie jakości (EQAS) z zadowalającymi wynikami. Jako środek zapewnienia jakości podjęto wszystkie niezbędne środki ostrożności przedanalityczne, analityczne i poanalityczne w celu zapewnienia, że dane te nie były tendencyjne.
2.6. Analiza statystyczna
Wszystkie obliczenia statystyczne zostały wykonane w programie Statistical Package for Social Sciences (SPSS) wersja 7.5 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Średnia, mediana i odchylenie standardowe zostały obliczone dla normalnie dystrybuowanych danych ciągłych. Aby dokładniej określić rozpiętość danych, przedstawiono 2,5 i 97,5 percentyla.
Dla charakterystyki demograficznej i biochemicznej, zmienne ciągłe wyrażono jako średnią i odchylenie standardowe (SD), podczas gdy zmienne kategoryczne podsumowano jako częstotliwość i procent. Wszystkie testy statystyczne były 2-stronne, a a uznano za poziom statystycznie istotny.
3. Wyniki
W obecnym badaniu wybrano przekrój społeczności i po starannym przesiewowym badaniu, z 2000 wybranych osób, 630 z nich zostało wykluczonych dla różnych nieprawidłowych parametrów biochemicznych i w sumie 1470 osób zostało ostatecznie zachowanych do włączenia do tego badania.
Próba badawcza to 51% () mężczyzn i 49% () kobiet ze stosunkiem mężczyzn do kobiet wynoszącym 1,05 : 1. Rozkład płci w populacji przedstawiono na rysunku 1.
Rozkład płci.
Wyniki wybranych cech populacji docelowej wraz ze środkowym 95 percentylem (średnia ± 2 SD) przedstawiono w tabeli 5, a rozkłady stężeń kwasu moczowego w surowicy na rycinie 2.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Rozkład kwasu moczowego.
Średni wiek, waga, wzrost i poziom kwasu moczowego w surowicy całej populacji to odpowiednio lata, kg, cm i mg/dL. Grupa wiekowa badanej populacji mieści się w przedziale od 35 do 86 lat. Zauważono, że wszystkie analizowane parametry wykazują istotnie wyższe wartości średnie u mężczyzn niż u kobiet. Na przykład, w przypadku wieku, średnia dla mężczyzn wynosi 55,3 lat, podczas gdy dla kobiet 51,7 lat. Podobnie, średnie wartości masy ciała, wzrostu i kwasu moczowego u mężczyzn (odpowiednio 64,3 kg, 164,4 cm i 6,1 mg/dl) są istotnie wyższe ( we wszystkich) niż u kobiet, które wynoszą odpowiednio 60,7 kg, 155,4 cm i 4,7 mg/dl. 98,6% () populacji to osoby niewegetariańskie w porównaniu do zaledwie 1,4% () wegetarian. Jeśli chodzi o rozkład mieszkalny, 75,9% () badanej populacji pochodzi z obszaru miejskiego, a 24,1% () z obszaru wiejskiego.
Średnia, mediana, SD oraz 2,5 i 97,5 percentyl kwasu moczowego (tj, dolne i górne granice środkowego 95 percentyla) próbek populacji, według wieku i płci, podsumowano na rycinie 3 i w tabeli 6.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Ref. zakres kwasu moczowego stosowany obecnie w laboratoriach-mężczyźni: 3,5-7,7 mg/dl i kobiety: 2,6-6,0 mg/dl. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Porównanie wyników kwasu moczowego pomiędzy kobietami i mężczyznami.
Zauważono, że wraz z wiekiem średnia i mediana poziomu kwasu moczowego również stopniowo wzrasta, z wyjątkiem grupy wiekowej 81-90 lat, gdzie liczba badanych jest bardzo mała w porównaniu z innymi sklasyfikowanymi grupami wiekowymi. Środkowy 95 percentyl kwasu moczowego w surowicy również różni się w różnych grupach wiekowych i stwierdza się, że w grupie wiekowej 61-70 lat jest on znacznie szerszy i waha się od 2,4 mg/dl do 8,8 mg/dl. We wszystkich grupach wiekowych mężczyźni mają wyższe wartości średnie i mediany niż kobiety. W młodszej grupie wiekowej (31-40 lat) stężenie u mężczyzn przewyższa stężenie u kobiet o około 2,2 mg/dl. Jednak wraz z wiekiem różnica ta zaczyna się zmniejszać. Na przykład, w grupie wiekowej 41-50 lat różnica ta wynosi 1,7 mg/dl, a następnie spada do prawie 1 mg/dl. Wyniki uzyskane u kobiet mają rozkład normalny w wieku 31-50 lat, ale wraz z wiekiem ulegają dodatniej skośności. Średnia wykazuje tendencję wzrostową, osiągając maksimum w wieku 51-60 lat, a następnie stopniowo spada. Odwrotną tendencję obserwuje się u mężczyzn. Średnia jest wyższa w młodszej grupie wiekowej, tj. w przedziale 31-50 lat. Wykonując testy Chi-kwadrat (tab. 7) stwierdzamy, że kwas moczowy wykazuje wysoce istotną zależność z płcią (), natomiast nie wykazuje istotnej statystycznie zależności z wiekiem (), wzrostem (), masą ciała (), dietą () i miejscem zamieszkania ().
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||
4. Dyskusja
Zalecana przez IFCC procedura identyfikacji, gromadzenia i pomiaru wystarczającej liczby próbek z odpowiednio dużej populacji referencyjnej jest niewykonalna dla większości laboratoriów, które w związku z tym muszą opierać się na zakresach referencyjnych, które są oparte na wartościach uzyskanych w różnych zestawach standaryzowanych na populacji zagranicznej, a nie na badaniach przeprowadzonych na dobrze scharakteryzowanej próbie populacji. Mając na uwadze wszystkie te fakty, do obecnego badania wykorzystano pokaźną, reprezentatywną populację Assamczyków, zarówno z obszarów miejskich, jak i wiejskich, która obejmuje prawie wszystkie plemiona i grupy etniczne, które żyły w Assam i spełniały wszystkie niezbędne kryteria.
W obecnym badaniu znaleźliśmy bardzo szeroki zakres referencyjny kwasu moczowego, wahający się od 2,6 mg/dl do 8,2 mg/dl. W przypadku mężczyzn wynosi on 3,5-8,7 mg/dl, a w przypadku kobiet 2,5-6,9 mg/dl. Górne granice (tj. 97,5 percentyla) obu tych wartości są większe (o prawie 1 mg/dl) od aktualnych zakresów referencyjnych stosowanych w naszym laboratorium (mężczyźni: 3,5-7,7 mg/dl i kobiety: 2,6-6,0 mg/dl). Mogło to być spowodowane niestandardowym doborem badanych. Również obliczony zakres referencyjny dla mężczyzn w naszym badaniu jest szerszy niż zakres referencyjny uzyskany w badaniu przeprowadzonym przez Cook i wsp. w 1970 roku. Zauważono również, że mężczyźni mają istotnie wyższe wartości średnie niż kobiety () i jest to widoczne we wszystkich klasyfikowanych grupach wiekowych. W przypadku mężczyzn, istnieje niewielka zmiana w wartości średniej z wiekiem, ale istnieje tendencja do ujemnej skośności z rosnącym wiekiem. W przypadku kobiet obserwuje się odwrotną tendencję, tj. wyniki kobiet wykazują tendencję do dodatniej skośności wraz z wiekiem. Podobne ustalenia są również obserwowane w badaniu przeprowadzonym przez Gardnera i Scotta w 1980 roku. Zauważono również, że średnia kwasu moczowego w grupie kobiet przed menopauzą jest mniejsza niż w grupie kobiet po menopauzie. Wzrost ten został stwierdzony w niektórych wcześniejszych badaniach, a wzrost ten jest uważany za związany z utratą estrogenów w okresie pomenopauzalnym. Bengtsson i Tibblin w 1974 r. oraz McPherson i wsp. w 1978 r. porównali poziom kwasu moczowego w surowicy krwi między dopasowanymi wiekowo kobietami przed i po menopauzie i nie stwierdzili istotnej różnicy między ich poziomami kwasu moczowego. Wyłączając płeć, nie znaleźliśmy żadnego znaczącego związku kwasu moczowego z innymi wybranymi czynnikami w naszym badaniu.
5. Wnioski
Nasze badanie ma kilka ograniczeń, takich jak brak kontynuacji badanych i wielkość próby. Nie badaliśmy wpływu statusu rasowego i socjoekonomicznego, ponieważ naszym celem było odzwierciedlenie stanu populacji jako całości. Innym niedociągnięciem badania jest nieuwzględnienie grup wiekowych poniżej 30 lat. Uczestnikami badania była grupa osób w stosunkowo podeszłym wieku, z których część stanowiły osoby zgłaszające się na kontrolę wykonawczą, a druga część pochodziła z grupy kontrolnej badania nad udarem mózgu. Duże prospektywne badanie obejmujące wszystkie grupy wiekowe różnych grup etnicznych regionu północno-wschodniego będzie o wiele bardziej pomocne, biorąc pod uwagę, że nasz szpital (GNRC Hospitals, Dispur) jest miejscem skierowania dla całego północnego wschodu.
Konflikt interesów
Autorzy deklarują, że nie ma konfliktu interesów w związku z publikacją tej pracy.