Agarose

Agarose Powders and Precast Gels

Bio-Rad oferece uma variedade de pós de agarose e géis de agarose pré-fabricados para atender a todas as suas necessidades de eletroforese de DNA e RNA, incluindo eletroforese de gel de campo de pulso e aplicações especiais, como IEP e IEF. Os pós são certificados com a agarose de ADN testada com qualidade genética. Nossos géis pré-moldados estão disponíveis tanto em tampão TBE ou TAE, com ou sem brometo de etídio.

Tipos de açarose e usos em eletroforese

Todos os produtos de agarose Bio-Rad são garantidamente livres de inibidores, DNases e RNases. Há uma gama de tipos de agarose que foram otimizados para diferentes usos.

Agarose em biologia molecular: Esta é uma agarose de uso geral que tem um alto limite de exclusão. Este tipo de agarose tem alta força de gel e é fácil de manusear em baixas percentagens. A agarose de biologia molecular é de grau GQT (qualidade genética testada), tornando-a ideal para géis preparativos e recuperação de DNA. A separação analítica é >1.000 pares de bases (bp).

Agarose de baixa fusão: O principal uso da agarose de baixa feltragem é para electroforese preparativa. É ideal para aplicações in-gel tais como ligadura, PCR, digestão enzimática de restrição, transformação e sequenciação. Outras aplicações incluem eletroforese de campo pulsado de DNA de megabase e incorporação de cromossomos. Esta agarose tem uma temperatura de gelificação de 26°C e alta capacidade de resolução, >1.000 kb.

Agarose de baixa fusão também é usada para fixar tiras de gradiente de pH imobilizado (IPG) para focalização isoelétrica, a segunda dimensão da SDS-PAGE 2-D. Esta agarose contém azul de bromofenol para monitorização da electroforese.

PCR agarose: Esta agarose de alta resistência forma géis que são fáceis de manusear e permanecem flexíveis mesmo em altas percentagens de gel, reduzindo o risco de rachar ou quebrar. A temperatura de gelificação é de 40°C. Esta agarose tem excelentes propriedades de peneiração e a maior força de gel de todos os agaroses.

PCR agarose de baixa feltragem tem uma alta capacidade de peneiração. É ideal para electroforese preparativa e aplicações in-gel tais como digestão enzimática de restrição, ligadura e transformação. Os agaroses PCR são recomendados para fragmentos de DNA <1.000 bp.

Agarose ultra-agarose de baixo alcance: Esta agarose fornece resolução de primers e pequenos produtos PCR a concentrações mais baixas do que a agarose padrão, evitando a necessidade de usar poliacrilamida. Um gel a 3% resolve claramente uma escada de 10 bp. A separação analítica é de 20-800 bp.

Megabase agarose: Esta agarose tem uma força de gel muito alta, alta mobilidade eletroforética, e alto limite de exclusão. A agarose megabase é a melhor escolha para aplicações de campo elétrico homogêneo (CHEF) e eletroforese em gel de inversão de campo (FIGE). Os géis permanecem fáceis de manusear em concentrações tão baixas quanto 0,3% e permitem tempos de execução mais curtos. A coloração de fundo baixa também fornece imagens superiores de DNA de alto peso molecular. A faixa de separação está entre 1 kb e 5 Mb.

Agarose de campo pulsado: A electroforese em gel de campo pulsado (PFGE) é utilizada para a separação de grandes fragmentos de ADN. Embora os géis fundidos com esta agarose tenham tempos de execução PFGE mais longos do que com a agarose megabase, as condições de execução para esta agarose são um protocolo pré-definido, selecionável, para o auto-algoritmo do sistema CHEF Mapper® XA. O intervalo de separação é de 1 kb a 2 Mb.

Agarose para IEP e IEF: Os agaroses estão disponíveis para imunoelectroforese (IEP) e focalização isoeléctrica (IEF). Eles podem ser usados para determinar os pesos moleculares relativos (Mr). A agarose para IEF não tem eletroendosmose detectável.

Gel de agarose pré-determinado

Gel de agarose pré-determinado tem várias vantagens, além da velocidade e reprodutibilidade. A bandeja de travamento significa que os géis de agarose não se movem durante o carregamento e no início de uma corrida, o que pode desperdiçar amostra, dar cargas irregulares, e diminuir a nitidez da banda. A bandeja transparente tem poços numerados fluorescentes que ajudam a acompanhar os padrões de carga quando há muitas amostras, assim como uma régua fluorescente para medir a migração.

Uma grande variedade de géis, 1 e 3% de agarose, TBE e TAE, e com e sem brometo de etídeo, está disponível. As configurações dos poços se adequam às necessidades desde o preparativo até a triagem de um grande número de amostras (até quatro fileiras de poços). A uniformidade torna os géis de agarose pré-fabricados fáceis de carregar com uma pipeta multicanal.

Géis de agarose pré-fabricados proporcionam excelente separação e resolução do DNA, e são compatíveis com a maioria dos sistemas de eletroforese horizontal submarina.

Mais informações sobre a agarose

Agarose é um polissacarídeo linear feito de unidades repetidas de agarobiose que é extraído de algas vermelhas fervidas. A sua carga neutra, baixa temperatura de gelificação e a formação de géis estáveis com poros de grandes dimensões fazem da agarose um bom meio para electroforese e cromatografia. Os géis de agarose são fáceis e rápidos de preparar, e podem separar fragmentos de DNA que variam de cerca de 20 bp a muitas megabases. As contas de agarose são usadas extensivamente para cromatografia em coluna, particularmente na exclusão de tamanho e cromatografia de afinidade.