A biomassa com capacidade de absorção de fosfato desnitrificante foi testada sob condições anaeróbias-aeróbias e anaeróbias-anóxicas sequenciais. A dose inicial de acetato, sob condições anaeróbias variou para atingir diferentes PHA (poli-hidroxialcanoatos) saturação das células PAO (organismos acumuladores de polifosfato). O aumento da dosagem de acetato sob condições anaeróbias levou a uma maior libertação de fosfatos e ao aumento do armazenamento de PHA pelos PAOs e, também, a maiores taxas de absorção de fosfatos sob as seguintes condições aeróbias e/ou anóxicas. Os resultados experimentais também indicaram que quando o carbono orgânico é limitado sob condições anaeróbias, mais glicogênio interno suplementar à clivagem do polifosfato é utilizado pela biomassa, resultando em menos liberação de fosfato e mais PHA armazenados por acetato absorvido. Na fase aeróbia e/ou anóxica subsequente, os PAOs demonstram um melhor desempenho do EBPR (enhanced biological phosphorus removal), no que diz respeito ao consumo de PHA por fosfato absorvido, para reduzir o conteúdo inicial de PHA da biomassa, tanto em condições aeróbias como anóxicas. O exame da biomassa EBPR em condições operacionais controladas, onde a análise experimental dos compostos relevantes na fase a granel (PO(4)(3-), NO(3)(-) e/ou O(2)) em conjunto com os produtos intracelulares de biomassa (PHA, glicogénio), contribui para uma melhor compreensão do comportamento metabólico dos PAOs, no que diz respeito à disponibilidade de substrato orgânico.