Frontiers in Veterinary Science

Introduction

Laser therapy is a novel rehabilitation technique being used in veterinary medicine for both rehabilitation and therapeutic purposes. A fotobiomodulação (PBM) induzida pela terapia laser é a aplicação de radiação electromagnética dentro do espectro infravermelho próximo e destina-se a estimular a cicatrização ou analgesia dentro do tecido alvo. Atualmente a laserterapia está sendo defendida para uma variedade de condições, algumas das quais incluem dor musculoesquelética, osteoartrite, dor articular e inflamação, dor neuropática, otite, dermatite, feridas crônicas ou não cicatrizantes e úlceras decubitais (1-5).

Existem três fases de cicatrização da ferida; as fases inflamatória, proliferativa e remodeladora. A fase inflamatória é iniciada no momento da lesão e começa com a hemostasia e formação do tampão plaquetário. As plaquetas libertam um factor de crescimento derivado das plaquetas que atrai os neutrófilos e, mais importante, os macrófagos. Os macrófagos atraem os fibroblastos e, portanto, iniciam a fase proliferativa. Os fibroblastos diferenciam-se em miofibroblastos e causam a contracção dos tecidos. A resistência à tracção é aumentada pela reorganização do colagénio e o resultado final é uma ferida que atinge 80% da resistência do tecido não lesionado (6, 7). Tem sido demonstrado em estudos experimentais que a laserterapia reduz a dor, influencia positivamente as fases inflamatórias, proliferativas e de maturação da cicatrização da ferida e aumenta a força de tracção da ferida (6, 8-10). No entanto, a maioria destes estudos tem sido em animais de laboratório e não contabilizam a diferença na cicatrização de feridas entre espécies.

Embora os inúmeros relatos dos potenciais efeitos positivos da laserterapia em várias aplicações tanto para a medicina humana como veterinária, não existem protocolos exactos para várias condições, e a cicatrização dos tecidos não existe. Estudos recentes em medicina veterinária mostram o potencial benefício da cicatrização de feridas usando PBM induzida pela laserterapia, incluindo a cicatrização acelerada de feridas de membros distais equinos usando um comprimento de onda de 635 nm e uma saída de energia de 17 mW por diodo para uma densidade de potência de 5,1 J/cm2 (11). Outro estudo canino recente mostrou que a cirurgia em combinação com PBM diminui o tempo de ambulação em cães com mielopatia T3-L3 secundária à hérnia de disco intervertebral usando um comprimento de onda de 810 nm e uma saída de energia de 200 mW para uma densidade de potência de 2-8 J/cm2 (4). Observando outros relatos de laserterapia na literatura, os protocolos de cicatrização de feridas variam de 1 a 40 J/cm2, consequentemente necessitando da necessidade contínua de estudos de pesquisa controlados para avaliar a eficácia dos protocolos propostos usando densidades de potência especificadas em tecidos-alvo específicos para indicações clínicas definidas (8, 12-17).

Este estudo tenta medir objetivamente a capacidade do PBM induzido pela laserterapia para acelerar o tempo de cicatrização de feridas criadas cirurgicamente usando uma escala de cicatrização previamente descrita que corresponde à histopatologia (18). Esta escala de cicatrizes usando fotografia tem mostrado em numerosas espécies que a cosmética cicatricial é um indicador consistente e sensível da cicatrização histológica e é independente do revisor (3, 18-21). Usando fotografias digitais, cegas para os revisores, o presente estudo avaliou a cicatrização, evitando a coleta de amostras de tecido. O objetivo do estudo foi avaliar objetivamente o uso da laserterapia como modalidade de tratamento em pacientes com doença do disco intervertebral canino (DIV) para a cicatrização da incisão cirúrgica.

Materiais e Métodos

Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade Estadual do Mississippi e todos os participantes do tratamento e controle de animais tiveram o consentimento informado do cliente documentado antes da inscrição no estudo. O uso de veterinários para marcar a cura da incisão foi aprovado pelo Comitê de Revisão Institucional da Universidade Estadual do Mississippi para a Proteção de Sujeitos Humanos em Pesquisa.

Pacientes de Dachshund que apresentam à Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Estadual do Mississippi para uma hemilaminectomia na região tóraco-lombar foram incluídos neste estudo. Não foram incluídos no estudo os dachshunds com uma pelagem colorida, problemas de saúde sistêmicos conhecidos, incisões fechadas com grampos, ou proprietários que não consentiram. Cães que tinham recebido cirurgias anteriores também não foram incluídos na população do estudo. Cães que preencheram os critérios de inclusão tiveram dados coletados com relação a sinal, peso, escore de condição corporal, cor da pelagem, localização da hérnia de disco, comprimento da incisão cirúrgica, tipo de sutura utilizada, uso de enxerto de gordura ou espuma de gel, administração de esteróides, medicações vesicais, estado neurológico na apresentação e no momento da alta.

Uma câmera de 10 mega-pixel1 foi utilizada para tirar fotografias digitais. As fotografias foram tiradas a uma distância igual (15 cm), ângulo, ajuste e iluminação nos dias 0, 1, 3, 5, e 7 e novamente no dia 21 de todos os cães, sendo o dia 0 o dia da cirurgia. Todas as fotografias foram tiradas com a distância padronizada da incisão, na mesma tabela de exames, com as mesmas configurações de câmera e 90° das costas dos cães, por um de dois autores (KG ou AW).

Uma escala de cicatriz clínica usando fotografia digital foi criada como descrito anteriormente (18). Os três primeiros cães apresentados que preencheram nossos critérios de inclusão tiveram fotografias digitais tiradas nos dias 0, 1, 3, 5, 7, e 21 utilizando as variáveis padronizadas listadas. Estes três cães foram utilizados para criar a escala de cicatriz de 0 a 5, sendo 0 uma incisão cirúrgica recente (foto do dia 0), pontuação 1 com incisão recente mas sem hemorragia presente (foto do dia 1), pontuação 2 com incisão com alguma crostas, inchaço ou hematoma (foto do dia 2), um escore de 3 tinha cicatrização visível com remodelação contínua da pele mas resolvendo hematomas ou inflamações (foto do dia 5), um escore de 4 tinha cicatrização em progresso mas uma cicatriz visível presente (foto do dia 7), e um escore de 5 tinha uma incisão cirúrgica completamente cicatrizada com epitelização, contração e recrescimento dos cabelos (foto do dia 21) (Figuras 1A,B).

Os três primeiros cães inscritos no estudo foram selecionados e fotografados para garantir a cura adequada e esperada sem complicações. Após os três primeiros cães terem sido utilizados para criar a escala de cicatriz visualmente representativa, o próximo cão qualificado foi atribuído a um dos dois grupos de tratamento (laser ou não laser) usando uma moeda ao contrário. Os cães subseqüentes foram então designados a todos os outros para manter grupos de tratamento de tamanhos semelhantes. Os cães de laserterapia receberam 8 J/cm2 diariamente durante sete dias, começando no dia 1, utilizando um laser veterinário de classe 3B2. O laser foi limpo antes e depois de cada paciente com o pano do sistema de polimento Novus fornecido pelo fabricante do laser. A incisão e um ponto adicional da cabeça da sonda (7,55 cm2) ao redor de toda a incisão (cranial, bilateralmente o comprimento da incisão e caudal) foram tratados, exceto sobre o local da laminectomia. O tempo total de irradiação dos pacientes variou devido aos comprimentos variáveis das incisões. A sonda3 foi aplicada com contato, mas sem pressão, perpendicular à pele, em todos os momentos utilizados. Foi utilizado o músculo pré-programado do fabricante / aumento da circulação local para o ajuste de pulso agudo e baixo. Este ajuste tem um ajuste de pulsátil a 8 Hz com 90% ligado, 10% desligado a 850 nm para diodos laser e 670 nm para LED e valores padrão a 4 J/cm2. Todos os pontos de tratamento receberam 4 J/cm2 neste padrão de pontos descritos, duas vezes durante cada tratamento totalmente 8 J/cm2 de dosagem de tratamento. As fotografias digitais foram tiradas nos dias 0, 1, 3, 5, 7, e 21. O grupo não laser não recebeu tratamento a laser, e teve fotos tiradas nos dias 0, 1, 3, 5, 7, e 21. Ao final do estudo todas as fotografias foram aleatoriamente atribuídas a um número, de 1 a 125, usando um computador gerado4, lista não classificada. As fotografias do cão à escala de cicatrizes foram dispostas em prancha de cortiça branca e rotuladas como 0, 1, 2, 3, 4, ou 5 para definir a escala de cicatrizes. A tábua representava uma pontuação de 0 (dia 0), 1 (dia 1), 2 (dia 3), 3 (dia 5), 4 (dia 7), e espaçadas linearmente até o dia 21 fotografias que representavam uma pontuação de 5 na escala de cicatrizes. As fotos do grupo de tratamento foram organizadas em ordem numérica ascendente de acordo com o número de imagem atribuído aleatoriamente.

Veterinários voluntários, não envolvidos na cirurgia, cuidados com o paciente, laserterapia ou aquisição de fotografias foram recrutados para pontuar as imagens (JW, EB, JB, RB, JG, LS). Todas as sessões de pontuação foram realizadas de forma privada, na mesma sala e durante o dia. Todos os voluntários foram instruídos a pontuar as imagens usando inteiros de 0 a 5 com base na cicatrização cosmética, considerando: escorrimento da incisão, hematoma, crosta, inflamação, edema, granulação, epitelização, contração e recrescimento do cabelo no local da incisão. Cada voluntário pontuou todas as fotografias uma vez e o fez em uma sessão. Uma vez que todos os seis avaliadores tinham classificado as imagens, o autor (JW) recebeu então as tarefas do grupo de tratamento dos co-investigadores (KG, AW) para enviar para análise estatística.

Os testes de significância das fontes de variação e confiabilidade entre os avaliadores foram determinados usando análise covariante realizada com o programa GLIMMIX do Sistema de Análise Estatística5. A importância clínica das diferenças estatisticamente significativas nos tratamentos foi avaliada por meio de intervalos de confiança (22). Um valor de P de < 0,05 foi considerado significativo. Os valores marginais livres de Kappa foram usados para avaliar a concordância entre médicos.

Resultados

Este estudo foi realizado inteiramente no Animal Health Center, College of Veterinary Medicine, Mississippi State University, de setembro de 2010 a maio de 2012. Doze cães preencheram os critérios de inclusão do ouri durante este período de tempo e foram designados como três cães de exemplo em escala de cicatrizes, cinco cães sem laser, e quatro cães de terapia a laser. O sinal, escore de condição corporal, comprimento da incisão, localização da lesão, uso de enxerto de gordura e/ou espuma de gel, material de sutura usado, administração de esteróides e estado neurológico no momento da cirurgia não diferiram entre cães com laser e cães sem laser. Todos os cães de laserterapia eram marrons, enquanto que o grupo sem laser continha três cães pretos e dois marrons. Todos os cães inscritos no estudo pareciam calmos e confortáveis para aquisição de fotografia e laserterapia; portanto, foram capazes de completar o estudo. Todos os cães permaneceram estáticos em seu estado neurológico no momento da descarga ou melhoraram, nenhum declinou. A maioria dos cães recebeu esteróides no momento da cirurgia ou antes do encaminhamento (67%). Alguns dos cães não laser (n = 4) e cães laser (n = 2) receberam esteróides. O tipo de esteróides, dosagem, tempo de administração e freqüência variaram dentro da população do estudo.

Os três primeiros cães curados sem incidentes, apareceram uniformemente cosméticos e foram selecionados para fazer a pontuação da escala de cicatriz. A pontuação da escala de cicatrizes dos cães do estudo foi significativamente associada ao dia da imagem (p < 0,0001), e se a laserterapia foi utilizada (p < 0,001), mas não por revisor (p = 0,9). As classificações da escala de cicatrizes foram semelhantes para todos os seis revisores veterinários que consistiram de um dermatologista, radiologista, especialista em animais de laboratório, clínico geral e dois cirurgiões (JG, EB, LS, JB, RB, JW). Não houve diferenças entre as pontuações da escala de cicatrizes nos dias 0, 1, 3 ou 5 entre os grupos. Houve uma melhora estatisticamente significativa nos escores de cicatrizes nos dias 7 e 21 para terapia a laser vs. cães sem laser (p < 0.0.1). A média de escore cicatricial foi significativamente maior para o laser (95% CI = 3,21-4,12) do que para cães sem laser (95% CI = 1,85-2,56) no 7º dia. A pontuação média da cicatriz foi significativamente maior para o laser (95% CI = 4,52-5,03) do que para cães sem laser (95% CI = 3,25-4,21) no dia 21 (Figuras 2A-C). Cães no dia 21 que receberam laserterapia tiveram menor variação em sua pontuação com pontuação média de 4,78 ± 0,54 vs. cães sem laser em média 3,73 ± 1,34 (Figura 3).

Resultados do dia 21 foram ainda comparados para os grupos de terapia laser e sem laser para oito pacientes utilizando os seis revisores. Um cão de laserterapia não retornou para a fotografia do 21º dia. Os cães que receberam tratamento com esteróides independentemente da laserterapia tiveram um escore cicatricial clinicamente significativo mais baixo (95% CI 3,41-4,25) vs. os cães que não receberam esteróides (média 5 ± 0,0) no 21º dia. Os cães que receberam esteróides tinham um escore cicatricial médio que era maior para aqueles que também receberam laserterapia (IC 95% = 4,30-5,32) em comparação com os cães que receberam esteróides que estavam no grupo sem laser (IC 95% = 2,89-3,94) no 21º dia. Mas os dois cães que receberam esteróides e laserterapia tiveram uma pontuação mediana de 5 e uma pontuação média de 4,8 no 21º dia. Os cães que receberam esteróides e não receberam tratamento a laser tiveram pontuação 1-3 pontos mais baixa na escala de cicatrizes no dia 21.

A pontuação média no dia 5 foi um ponto inteiro mais alta na escala de cicatrizes para o grupo de laser e continuou a ser um ponto mais alta em média até o dia 21. O desvio padrão (DP) variou de 0,85 a 1,6 para todas as pontuações, exceto para o grupo de laser do dia 21, que teve um DP de apenas 0,35, indicando forte concordância entre os revisores (Tabela 1). As medianas foram igualmente elevadas para o grupo tratado a laser a partir do terceiro dia e continuaram até o final do estudo. As medianas para o grupo de laser nos dias 0, 1, 3, 5, 7 e 21 foram 1, 2, 2,5, 3, 4 e 5, respectivamente. Os escores medianos para o grupo não laser nos dias 0, 1, 3, 5, 7 e 21 foram 1, 2, 2, 2, 2,5 e 4, respectivamente. No geral, houve um forte valor preditivo para a pontuação da escala de cicatrizes com tratamento com laser neste estudo (Figura 4). O Coeficiente de Correlação de Spearman foi estatisticamente significativo para a pontuação da cicatriz e dia para os revisores (rs = 0,80). Os valores de Kappa comparando a concordância entre os diferentes níveis de água são mostrados para cada dia (Tabela 2).

Discussão

Terapia com laser foi encontrada para acelerar a cicatrização de feridas, possivelmente estimulando a fosforilação oxidativa, reduzindo assim a resposta inflamatória e a dor (6, 8-10). Este estudo ajuda a apoiar a ideia de PBM induzida pela terapia laser como um componente vital para a cicatrização e reabilitação de feridas, mostrando o melhor resultado da terapia laser nas incisões cirúrgicas de cães com IVDD que foram submetidos a uma hemilaminectomia.

Cinco diferentes veterinários da especialidade e um clínico geral foram recrutados e receberam as mesmas instruções sobre a classificação da aparência cosmética geral, observando o escorrimento da incisão, hematoma, crosta, inflamação, edema, granulação, epitelização, contração e crescimento do pêlo no local da incisão. Outros estudos também avaliaram a capacidade de avaliar a cicatrização de feridas sem utilizar evidências histológicas e encontraram modalidades de sucesso, tais como uma escala de cicatrização clínica utilizando fotografia digital, que são indicadas em estudos ante-mortem (3, 18, 21). O uso da fotografia digital como um meio válido para avaliar a eficácia da cicatrização de feridas utilizando modalidades de tratamento específicas é de particular valor porque permite a avaliação grosseira do paciente e não necessita de confirmação histológica (3, 21). Este método de avaliação tem sido mais especificamente explorado utilizando cicatrizes de queimaduras em suínos, enxertos de pele humana e um estudo mais recente com laser canino (18, 23, 24). Tais estudos têm confirmado a correlação entre as características histológicas da cicatrização de feridas com a avaliação visual do desfecho clínico das cicatrizes. As informações extrapoladas deste estudo, e do estudo Gammel et al. (23), provam que é possível estabelecer uma escala de cicatrização clínica confiável usando fotografia digital (23). Este alto nível de correlação, portanto, indica que este é um método viável de se utilizar na análise de feridas criadas cirurgicamente tratadas com terapia auxiliar, como a PBM induzida por laserterapia. Observamos um grande aumento na concordância entre os médicos após o 7º dia, especialmente no grupo de laser no 21º dia, tendo excelente correlação entre os revisores (kappa 0,79). Enquanto a variância nos escores cicatriciais melhorou com a cicatrização, a variância nos escores do grupo laser foi menor ao longo do estudo e teve um escore numérico maior na escala ao longo do estudo. Isso aliado ao excelente valor kappa no dia 21 demonstrou que as cicatrizes de referência são um método potencialmente confiável para avaliar a cicatrização clínica em fotografias. No entanto, houve maior concordância com o aumento da familiaridade com a pontuação da escala cicatricial e pontuação repetida das fotografias (18). Wang et al. demonstraram um aumento dos coeficientes de correlação de 65% para mais de 80%, com classificações simplesmente repetidas das fotografias. Talvez tivéssemos tido maior concordância mais cedo nos resultados com os revisores pontuando as mesmas imagens várias vezes.

A administração de estroides para pacientes com DVDI continua sendo um osso de discórdia entre os veterinários. Neste estudo prospectivo, o tipo, dosagem e duração da administração de esteróides não foram controlados para que nenhuma conclusão pudesse ser tirada. Deve-se notar também que os esteróides de alta dose perioperatórios não são considerados como tendo efeito estatístico na cicatrização de feridas, em comparação com o uso crônico (25). O uso de esteróides durante 10 dias em humanos pode mostrar 2 a 5 vezes as taxas de complicação da ferida, mas varia com comorbidades, dose e cirurgia (25). Também evitamos o raio laser diretamente sobre o local da hemilaminectomia, devido a preocupações injustificadas de potencial contra-indicação para a laserterapia diretamente sobre a medula espinhal. Esta potencial preocupação tem sido refutada na literatura e tem demonstrado melhorar o resultado neurológico (4). Combinados com os nossos resultados, estes dois estudos sugerem um aumento da cicatrização cirúrgica em caninos com IVDD usando 8 J/cm2 diariamente durante a primeira semana após a cirurgia.

O nosso estudo utilizou uma dose mais elevada do que a anteriormente relatada para um relato de caso de uma ferida canina crónica (5 J/cm2), para a cicatrização da ferida (5 J/cm2), e para feridas abertas (1 J/cm2) (12, 23, 26). Deve-se notar também que estudos anteriores foram tratados por 4 ou 5 dias, e este estudo foi realizado por 7 dias consecutivos (4, 12). Um estudo adicional não teve benefícios aparentes para PBM para terapia 3 vezes por semana durante 32 dias de tratamento usando 1 J/cm2 (26). Isto sugere que uma dose maior e talvez uma programação de tratamento mais concentrada pode ser mais bem sucedida para a PBM. Mas como estes trabalhos não foram realizados de forma paralela, não está claro se o nosso sucesso em acelerar a cicatrização da ferida seria visto com um protocolo alterado.

Embora a terapia a laser de dois em dois dias, mais ou menos J/cm2 ou menos dias de tratamento possam alterar os resultados, os queratinócitos epidérmicos caninos mostraram efeitos prejudiciais a 10 J/cm2 (27). Como o intervalo na literatura para a cicatrização de feridas é de 1-40 J/cm2, escolhemos um intervalo médio, mas ainda uma dosagem agressiva para aumentar a chance de vermos um benefício, mas evitar danos aos tecidos. Recentemente a Associação Mundial de Laserterapia indicou que pelo menos 5-7 J/cm2 são necessários para induzir a mudança celular, sugerindo que esta seja a dosagem terapêutica mais baixa (28). Isto é potencialmente confirmado com os dois recentes estudos de cicatrização de feridas que não mostram benefício aparente com PBM usando 1 ou 5 J/cm2 em caninos (23, 26). No nosso estudo, muitos dos pacientes estavam prontos para ir para casa antes do tratamento completo de 7 dias estar concluído. Portanto, o sucesso da laserterapia precisaria ser avaliado em relação ao custo para o cliente para permanecer no hospital ou ter os pacientes retornando para tratamentos ambulatoriais diários. Os cães que não receberam o tratamento a laser pareciam ter uma cicatriz mais larga e mais crostas ainda presentes, sem crescimento de pêlos sobre a incisão ou epitélio de ponte no 21º dia. Talvez, eventualmente, ambos os grupos parecessem mais distantes no tempo. Isto não está claro uma vez que este estudo não acompanhou pacientes por mais de 21 dias.

Embora este estudo tenha se concentrado em pacientes com DVDI para uma cicatriz cirúrgica mais consistente, talvez este estudo pudesse ser extrapolado para incluir tratamento PBM para outras incisões cirúrgicas caninas ou feridas. Feridas semelhantes na fase inflamatória da cicatrização de feridas devem, teoricamente, responder de forma igualmente favorável como neste estudo. No entanto, uma vez que estas foram incisões cirúrgicas sem complicações, limpas e não abertas, estas conclusões não podem ser tiradas. Também não está claro se os pacientes felinos precisariam de uma dosagem alterada devido às suas diferentes propriedades vasculares e cicatrizantes da pele.

Uma grande limitação a este estudo inclui o pequeno tamanho da amostra, mas devido às grandes diferenças entre os grupos ainda foram encontrados valores estatísticos que provavelmente eram clinicamente significativos. Mas devido ao tamanho da amostra não foi possível tirar conclusões sobre outras variáveis interessantes como dor, uso de esteróides, função neurológica, ou variáveis metabólicas. Este é o primeiro estudo veterinário a utilizar figuras digitais e uma pontuação em escala de cicatriz para incisões cirúrgicas. Os revisores foram cegos para os grupos de tratamento e as fotos foram tiradas uniformemente para evitar a identificação do paciente, excluindo-se a coloração do dapple, a cirurgia anterior no dorso e o corte na incisão e na pele. Entretanto, as fotografias foram coloridas e o comprimento das incisões e do músculo axial não foram uniformes. Assim, enquanto os revisores estavam cegos para o grupo de tratamento, eles podem ter reconhecido o formato de uma incisão ou curva de uma coluna, enquanto passavam e pontuavam as imagens numeradas aleatoriamente. Portanto, eles podem ter notado uma tendência de cura na incisão de um paciente, mas foram cegados para o grupo de tratamento. A cicatrização mais completa, com o mínimo de cicatrização das feridas, mostrou uma coordenação muito forte com a força total de tracção (3, 10, 18, 21, 23, 26). Existem incentivos óbvios para um sistema de pontuação não-invasivo de cicatrização de feridas. Embora o verdadeiro teste de resistência à tracção da cicatrização de feridas entre os dois grupos tivesse sido mais conclusivo, o forte acordo entre os revisores mostra que estes animais não precisavam da morbilidade acrescida das biópsias em série. Este estudo não registou o tempo total de PBM em cada paciente. A dosagem foi pré-determinada e a área de tratamento que abrangia a incisão, mas o tamanho da incisão e do paciente variou; portanto, os joules totais e os tempos de tratamento variaram. Em estudos futuros, esta seria uma informação potencialmente valiosa para registrar e ajudar a uniformidade no relato e comparação de estudos PBM. Outras limitações do estudo foram a incapacidade de tirar conclusões sobre muitas das coisas que são fatores de risco conhecidos para a cicatrização anormal de feridas e fatores relacionados à cirurgia (ou seja, detalhes do esfoliante, temperatura corporal central, tempo cirúrgico).

Conclusão

As incisões cirúrgicas nestes quatro cães cicatrizaram mais rápido e mais cosmeticamente com PBM induzido por laserterapia usando 8 J/cm2 diariamente durante 7 dias. A melhora na cicatrização e na pontuação cosmética pôde ser vista a partir do 7º dia e continuou a ser melhorada por 3 semanas após a cirurgia.

Authors Contributions

JW, KG, e AW contribuíram para a concepção e desenho do estudo. AW organizou a base de dados. JW, EB, JB, RB, JG, e LS analisaram as figuras e pontuaram os pacientes. KG escreveu o pedido original de subsídio para este projecto. JW escreveu o rascunho original deste manuscrito. Todos os autores contribuíram para a revisão do manuscrito, leram e aprovaram a versão submetida. O autor correspondente assume a responsabilidade primária pela comunicação com a revista e com o escritório editorial durante o processo de submissão, durante a revisão por pares e durante a publicação. O autor correspondente também é responsável por assegurar que a submissão do manuscrito cumpra todos os requisitos da revista, incluindo, mas não exclusivamente, os detalhes de autoria, ética no estudo e aprovação ética, documentos de registro de estudos clínicos e declaração de conflito de interesses. O autor correspondente também deve estar disponível pós-publicação para responder a quaisquer dúvidas ou críticas.

Conflict of Interest Statement

Os autores declaram que a pesquisa foi conduzida na ausência de quaisquer relações comerciais ou financeiras que possam ser interpretadas como um potencial conflito de interesses.

Confirmações

Os autores reconhecem a assistência do Dr. Dennis E. Rowe para a realização da análise estatística.

Apoio em parte pelo Escritório de Pesquisa e Pós-Graduação, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Estadual do Mississippi.

Pés

A abreviaturas

PBM, Photobiomodulation; IVDD, Intervertebral Disc Disease.