Abstract
Denne undersøgelse var designet til at etablere referenceintervaller for serum urinsyre blandt raske voksne Assamesere. Prøver fra 1470 personer i alderen 35-86 år blev anvendt til at fastlægge alders- og kønsrelaterede referenceintervaller ved hjælp af centilemetoden (central 95-percentilen) for serumurinsyreniveauet. Der var 51 % () mænd og 49 % () kvinder; 75,9 % () af dem var fra byområder, og resten 24,1 % () var fra landområder. Størstedelen af befolkningen var ikke-vegetariske (98,6 %, ) og kun 1,4 % () var vegetariske. Den gennemsnitlige alder, vægt, højde og urinsyre i den undersøgte gruppe var henholdsvis år, kg, cm og mg/dL. Der er en statistisk signifikant forskel i gennemsnitsværdien af de ovennævnte parametre mellem mænd og kvinder. Det observerede referenceområde for urinsyre i befolkningen er 2,6-8,2 mg/dL, hvilket er bredere end det nuværende referenceområde, der anvendes i laboratoriet. Bortset fra køn () fandt vi ikke nogen signifikant sammenhæng mellem urinsyre og andre udvalgte faktorer.
1. Indledning
Serum urinsyre (SUA) er det vigtigste slutprodukt af purinmetabolismen hos mennesker; og niveauet af SUA er strengt kontrolleret af balancen mellem urinsyreproduktion og udskillelse . En række tidligere undersøgelser har rapporteret om forholdet mellem hyperurikæmi og forskellige kardiovaskulære sygdomme og deres risikofaktorer, herunder metabolisk syndrom (MS). Ifølge de tidligere undersøgelser viste ikke kun åbenlys hyperurikæmi, men også SUA-niveauer næsten inden for normalområdet en positiv korrelation med MS . Nyere undersøgelser har vist, at SUA-niveauet er signifikant forbundet med ikke-alkoholisk fedtleversygdom .
Den nuværende “reference” eller “normalområde”, der er fastsat for hyperurikæmi, undlader ofte at identificere patienter med potentielle stofskiftesygdomme . De anbefalede kriterier, der skal anvendes til udvælgelse af forsøgspersoner som kilde til referenceværdier, beskrivelsen af betingelserne for prøveindsamling og den statistiske terminologi til beskrivelse af disse værdier er for nylig blevet skitseret inden for humanmedicin . Fremgangsmåden med hensyn til udvikling af referenceværdier er blevet betragtet som et vigtigt skridt i retning af klinisk fortolkning af laboratoriedata . Klinikeren skal naturligvis sammenholde anamnese, kliniske tegn, sygdomsforekomst osv. med laboratoriedataene . De fleste medicinske laboratorier plejer at citere “normalområder” ikke så relateret, men ideelt set bør testresultater af de biokemiske parametre refereres til en population, hvis status er defineret .
Referenceområdet for en bestemt parameter defineres som koncentrationen af denne parameter i en gruppe af klinisk sunde personer . Under normale fysiologiske forhold holder de hæmostatiske mekanismer disse parametre inden for en vis grænse . Hos raske personer varierer de betydeligt i forskellige populationer . I kropsvæsker og i fravær af sygdomme påvirkes de af flere faktorer såsom alder, køn, personers kostvaner, geografisk beliggenhed og klima . Desuden viser flere af disse parametre døgn- og årstidsvariationer, og indgift af lægemidler eller vacciner til terapeutiske formål eller kliniske forsøg kan også forårsage betydelige variationer . De kan også ændre sig som følge af variationer i de teknikker, der anvendes af forskellige laboratorier . Parametrene kan også variere som følge af patologiske tilstande, der påvirker de vigtigste organer og systemer i kroppen, som producerer, udskiller eller lagrer dem, f.eks. lever, bugspytkirtel, nyre, knoglemarv og immunsystemet . Inden for klinisk kemi er referenceværdierne almindeligvis baseret på referenceværdier for den vestlige befolkning; disse stemmer normalt ikke overens med den indiske befolkning. Da referenceværdier anvendes af klinikere til fortolkning af måleresultater, bør de korrekt repræsentere en defineret befolkningsgruppe, som bør have stor lighed med de patienter, der er under behandling, og som skal undersøges. Da der indtil nu ikke er blevet fastsat veldokumenterede referenceværdier for urinsyre i den assamesiske befolkning, har vi planlagt denne undersøgelse for at evaluere referenceværdierne for urinsyre i den indiske assamesiske befolkning, idet vi har taget hensyn til behovet for baseline-referencelaboratorieintervaller, hvormed man kan overvåge fysiologiske eller patologiske ændringer.
2. Materialer og metoder
2.1. Undersøgelsespopulation
I alt 2000 personer af forskellig socioøkonomisk status fra begge køn blev screenet med henblik på at indgå i undersøgelsen. Baseline-informationer om detaljeret kost (veg/nonveg), medicinsk og familiemæssig historie sammen med oplysninger om livslang brug af tobak (ja/nej), alkoholholdige drikkevarer (ja/nej) og nuværende fysisk aktivitet blev indsamlet ved hjælp af et standardspørgeskema. Højde og vægt blev også målt, mens forsøgspersonerne var iført en let kjole og stod barfodet. Forsøgspersonerne blev anset for at kunne deltage i denne undersøgelse, hvis de opfyldte alle kriterierne efter den nødvendige screening i henhold til udelukkelseskriterierne i tabel 1.
|
|||||||||||||||||||
2.2. Prøvetagning
12 timer natten over fastende EDTA-, fluorid- og koagulerede venøse blodprøver blev indsamlet uafhængigt af årstidsvariationer i løbet af året. Serum og plasma blev fremstillet ved centrifugering ved 3000 rpm i 15 minutter, og analysen blev foretaget inden for 4 timer efter indsamlingen. Ud af de 2000 analyserede prøver blev 1470 medtaget i undersøgelsen efter eliminering af de resultater, der er nævnt i tabel 2.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2.3. Metode til estimering
Serumurinsyre blev estimeret ved hjælp af den fuldautomatiske indirekte uricase UV-metode. Denne metode er en modifikation af uricase-metoden, der først blev rapporteret af Bulgar og Johns , senere modificeret af Kalchan . Urinsyre, som absorberer lys ved 293 nm, omdannes af uricase til allantoin, som ikke absorberer ved 293 nm. Ændringen i absorbansen ved 293 nm som følge af urinsyrens forsvinden er direkte proportional med koncentrationen af urinsyre i prøven og måles ved hjælp af en bichromatisk (293, 700 nm) endepunktsteknik. Ved denne metode til serumurinsyrebestemmelse bestemmes den indledende UV-absorbans i reaktionsopløsningen før uricasepåvirkning og baggrundsabsorbansen efter endt uricasereaktion særskilt for at udlede netto-absorbansen af urinsyre . Uricase UV-metoden er modstandsdygtig over for almindelige endogene interferenser, f.eks. asorbat og glutathion, og er let at kalibrere i en autoanalyzer. Disse fordele gør, at den engang blev anbefalet som referencemetode af International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (IFCC) .
2.4. Validering af metoden
Den interne validering af metoden er foretaget i overensstemmelse med CLSI-retningslinjerne, herunder beregning af præcision, bias, verifikation af linearitet, følsomhed og assayinterferens. Præcisionen og bias beregnes (tabel 3) på 20 replikater over en periode på 20 dage på QC-materialer. Lineariteten er verificeret, og metoden er lineær op til 20 mg/dL.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Urinsyremetoden blev evalueret for interferens fra hæmolyse, icterus og lipæmi i henhold til CLSI/NCCLS EP7-P. Bias, defineret som forskellen mellem kontrolprøven (indeholder ikke interferens) og testprøven (indeholder interferens), er vist i tabel 4. Bias på over 10 % betragtes som “interferens”.”
|
||||||||||||||||||||||
Analysefølsomheden er 0,01 mg/dL. Den repræsenterer den laveste koncentration af urinsyre, der kan skelnes fra nul.
2,5. Kvalitetssikring/kvalitetskontrol
For at sikre testresultaternes nøjagtighed og præcision blev der taget hensyn til alle præanalytiske, analytiske og postanalytiske forholdsregler. Instrumenter, personale og procedurevalidering blev udført gennem et internt kvalitetskontrolprogram (QC) med beregning af standardafvigelser (SD) og variationskoefficienter (CV). Den giver et overblik over det kvalitetskontrolmateriale, der er anvendt til evaluering af assayet, sammen med den daglige variationskoefficient. Laboratoriet har også deltaget i et eksternt kvalitetsprogram (EQAS) med tilfredsstillende resultater. Som en kvalitetssikringsforanstaltning blev der truffet alle nødvendige præanalytiske, analytiske og postanalytiske forholdsregler for at sikre, at disse data ikke var skævvredet.
2.6. Statistisk analyse
Alle statistiske beregninger blev udført på softwaren Statistical Package for Social Sciences (SPSS) version 7.5 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Middelværdi, median og standardafvigelse blev beregnet for normalt fordelte kontinuerlige data. For yderligere at kvantificere spredningen af dataene er den 2,5. og den 97,5. percentil blevet præsenteret.
For de demografiske og biokemiske karakteristika blev de kontinuerlige variabler udtrykt som gennemsnit og standardafvigelse (SD), mens de kategoriske variabler blev sammenfattet i frekvens og procentdel. Alle statistiske tests var 2-sidede, og a blev anerkendt som det statistisk signifikante niveau.
3. Resultater
I denne undersøgelse blev der udvalgt et tværsnit af samfundet, og efter omhyggelig screening blev 630 af de 2000 udvalgte individer fra 2000 individer udelukket på grund af forskellige unormale biokemiske parametre, og i alt 1470 individer blev i sidste ende tilbageholdt til medtagelse i denne undersøgelse.
Undersøgelsesprøven er 51% () mandlig og 49% () kvindelig med et mand-kvindeforhold på 1,05 : 1. Kønsfordelingen af populationen er vist i figur 1.
Kønsfordeling.
Resultaterne af de udvalgte karakteristika for målpopulationen sammen med centrale 95-percentiler (gennemsnit ± 2 SD) er vist i tabel 5, og fordelingerne af serumurinsyrekoncentrationerne er vist i figur 2.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Fordeling af urinsyre.
Middelalder, vægt, højde og serumurinsyreindhold for hele populationen er henholdsvis år, kg, cm og mg/dL. Målpopulationens aldersgruppe spænder fra 35 til 86 år. Det bemærkes, at alle de analyserede parametre viser en signifikant højere middelværdi hos mænd end hos kvinder. F.eks. når det gælder alder, viser mænd en gennemsnitlig værdi på 55,3 år i forhold til kvinder, som er 51,7 år. Ligeledes er gennemsnitsværdierne for vægt, højde og urinsyre hos mænd (henholdsvis 64,3 kg, 164,4 cm og 6,1 mg/dL) signifikant højere ( i alt) end hos kvinder, som er henholdsvis 60,7 kg, 155,4 cm og 4,7 mg/dL. 98,6 % () af befolkningen er ikke-vegetariske i forhold til kun 1,4 % () vegetariske. Med hensyn til boligfordelingen er 75,9 % () af undersøgelsespopulationen fra byområdet og 24,1 % () er fra landområdet.
Middelværdien, medianen, SD og de 2,5 og 97,5 percentiler af urinsyre (dvs, nedre og øvre grænse for den centrale 95-percentil) for populationsprøverne i henhold til alder og køn er opsummeret i figur 3 og tabel 6.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Ref. interval for urinsyre, der i øjeblikket anvendes i laboratorier – mænd: 3,5-7,7 mg/dL og kvinder: 2,6-6,0 mg/dL. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Sammenligning af resultater af urinsyre mellem mænd og kvinder.
Det ses, at med stigende alder stiger middel- og medianurinsyreniveauet også gradvist, undtagen i aldersgruppen 81-90 år, hvor antallet af forsøgspersoner er meget lille sammenlignet med de andre klassificerede aldersgrupper. Den centrale 95-percentilen for serumurinsyre varierer også i de forskellige aldersgrupper, og det konstateres, at den i aldersgruppen 61-70 år er meget bredere og varierer fra 2,4 mg/dL til 8,8 mg/dL. I alle aldersgrupper har mænd højere middel- og medianværdier end kvinderne. I den yngre aldersgruppe (31-40 år) overstiger mændenes værdier kvindernes værdier med ca. 2,2 mg/dl. Men efterhånden som alderen stiger, begynder denne forskel at falde. I aldersgruppen 41-50 år er forskellen f.eks. 1,7 mg/dL, og herefter er den faldet til næsten 1 mg/dL. Resultaterne fra de kvindelige forsøgspersoner er normalt fordelt i alderen 31-50 år, men skævvrides positivt med stigende alder. Gennemsnittet viser en stigende tendens med et maksimum i en alder af 51-60 år, hvorefter det gradvist falder. Det omvendte er observeret hos mænd. Gennemsnittet er højere i den yngre aldersgruppe, dvs. mellem 31-50 år. Ved at udføre Chi-square-test (tabel 7) finder vi, at urinsyre har en meget signifikant sammenhæng med køn (), men at den ikke viser statistisk signifikant sammenhæng med alder (), højde (), vægt (), kost () og bopæl ().
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||
4. Diskussion
Den af IFCC anbefalede procedure for at identificere, indsamle og måle tilstrækkeligt mange prøver fra en tilstrækkelig stor referencepopulation er ikke mulig for de fleste laboratorier, som således er nødt til at basere sig på referenceintervaller, der er baseret på værdier opnået i forskellige kits standardiseret på en udenlandsk population, snarere end på undersøgelser udført på en velkarakteriseret prøve af populationen. Under hensyntagen til alle disse kendsgerninger anvendes en betydelig, repræsentativ assamesisk befolkning både fra by- og landområder, som omfatter næsten alle de stammer og etniske grupper, der har boet i Assam, og som opfylder alle de nødvendige kriterier, til den foreliggende undersøgelse.
I den foreliggende undersøgelse har vi fundet et meget bredt referenceområde for urinsyre, der spænder fra 2,6 mg/dL til 8,2 mg/dL. For mænd er det 3,5-8,7 mg/dL, og for kvinder er det 2,5-6,9 mg/dL. De øvre grænser (dvs. 97,5 percentil) for begge er større (med næsten 1 mg/dL) end de nuværende referenceintervaller, der anvendes i vores laboratorium (mænd: 3,5-7,7 mg/dL og kvinder: 2,6-6,0 mg/dL). Dette kan være forårsaget af den ikke-standardiserede udvælgelse af forsøgspersoner. Det beregnede referenceområde for mænd i vores undersøgelse er også bredere end det referenceområde, der blev opnået i en undersøgelse foretaget af Cook et al. i 1970 . Det er også observeret, at mænd har en signifikant højere middelværdi end kvinder (), og det er fremtrædende i alle de klassificerede aldersgrupper. For mændenes vedkommende er der en lille ændring i gennemsnitsværdien med alderen, men der er en tendens til negativ skævhed med stigende alder. Men det modsatte er observeret for kvindernes vedkommende, dvs. at resultaterne for kvinderne har en tendens til positiv skævhed med stigende alder. Lignende resultater er også observeret i en undersøgelse foretaget af Gardner og Scott i 1980 . Det er også konstateret, at den gennemsnitlige urinsyreværdi i gruppen af kvinder i præmenopausal alder er lavere end i gruppen af kvinder i postmenopausal alder. Denne stigning er også blevet fundet i nogle tidligere undersøgelser, og denne stigning menes at kunne tilskrives tab af østrogen i postmenopausale perioder. Bengtsson og Tibblin i 1974 og McPherson et al. i 1978 sammenlignede serumurinsyreniveauet mellem aldersmatchede præ- og postmenopausale kvinder og fandt ingen signifikant forskel mellem deres urinsyreniveauer. Hvis man ser bort fra køn, fandt vi ingen signifikant sammenhæng mellem urinsyre og andre udvalgte faktorer i vores undersøgelse.
5. Konklusion
Vores undersøgelse har flere begrænsninger, såsom manglende opfølgning af forsøgspersoner og stikprøvestørrelse. Vi har ikke undersøgt effekten af race og socioøkonomisk status, da vores formål var at afspejle tilstanden i befolkningen som helhed. De andre mangler ved undersøgelsen er manglende inddragelse af aldersgrupper under 30 år. Deltagerne i denne undersøgelse var en gruppe af relativt ældre personer, hvoraf en del var personer, der kom til helbredsundersøgelse, og en anden del var fra en kontrolgruppe i en undersøgelse af slagtilfælde. En stor prospektiv undersøgelse, der omfatter alle aldersgrupper af forskellige etniske grupper i den nordøstlige region, vil være langt mere nyttig i betragtning af, at vores hospital (GNRC Hospitals, Dispur) er henvisningssted for hele den nordøstlige region.
Interessekonflikter
Forfatterne erklærer, at der ikke er nogen interessekonflikter i forbindelse med offentliggørelsen af denne artikel.